Dans une étude récente publiée dans le iScience journal, les chercheurs ont évalué l’efficacité de l’immunisation avec un peptide bactérien conjugué au domaine de liaison au récepteur du coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère (SRAS-CoV-2) contre l’infection par le SRAS-CoV-2.
L’émergence constante de nouvelles variantes du SRAS-CoV-2 a nui à l’efficacité et à l’impact des vaccins contre la maladie à coronavirus 2019 (COVID-19) contre les infections et la gravité de la maladie. Par conséquent, de nouvelles plateformes de vaccins sont nécessaires pour développer des schémas de vaccination efficaces et sûrs contre les infections par le SRAS-CoV-2 et les hospitalisations associées.
À propos de l’étude
Dans la présente étude, les chercheurs ont utilisé la technologie immunitaire Boost (iBoost) pour améliorer la réponse du système immunitaire contre le SARS-CoV-2 spike (S) RBD.
L’équipe a réalisé l’identification immunisée de SARS-CoV-2 RBD en conjuguant la séquence à un peptide concepteur chimérique (CDP) machiné par les chercheurs. Le CDP comprend des grappes d’acides aminés ayant soit des chaînes latérales chargées, soit des groupes hydrophiles volumineux, dérivés de trois protéines bactériennes différentes, à savoir ZapB qui est la protéine de division cellulaire, IbpA qui est une petite protéine de choc thermique et TFP (protéine fimbriale de type I) . La protéine conjuguée développée nommée CPD-RBD a été exprimée et purifiée.
L’immunogénicité du conjugué CPD-RBD in vivo a été évalué et comparé au RBD non conjugué correspondant en immunisant des souris BALB/c avec chaque protéine purifiée au jour 0 par primovaccination et au jour 14 par une vaccination de rappel. L’équipe a sélectionné Montanide ISA 720 avec un agoniste du récepteur de type péage 9 appelé oligonucléotide CpG 1826 comme adjuvant vaccinal. Des échantillons sérologiques ont été prélevés sur les souris avant l’immunisation au jour 0 et aux jours 13, 21, 28 et 35. Les échantillons ont ensuite été analysés pour détecter la présence d’anticorps anti-RBD à l’aide d’un dosage immuno-enzymatique (ELISA).
En outre, l’équipe a évalué la production d’IgG1 et d’IgG2b, qui représentaient des réponses immunitaires asymétriques T-helper (Th)-2, et d’IgG2a et d’IgG3, qui étaient corrélées à la stimulation d’une réponse Th1. Les chercheurs ont également immunisé des souris avec CPD-RBD ou RBD seul avec le Sepivac (Sep), qui était un adjuvant vaccinal utilisé à la place du Montanide.
Résultats
Les résultats de l’étude ont montré que l’ajout du composant DCP au SARS-CoV-2 RBD augmentait la solubilité ainsi que le rendement en protéines de la protéine conjuguée résultante CPD-RBD. La en silicone l’analyse de la séquence de la protéine conjuguée a montré les domaines de l’hélice alpha ou du brin bêta. De plus, les épitopes des lymphocytes B et des lymphocytes T observés dans en silicone l’analyse a indiqué une puissante reconnaissance immunitaire.
L’équipe n’a trouvé aucun anticorps contre le SRAS-CoV-2 RBD dans les échantillons de sérum pré-immun prélevés au jour 0. Cependant, une séroconversion a été observée au jour 13 chez quelques souris appartenant à la fois aux groupes vaccinés par le conjugué et le non conjugué. protéines purifiées. De plus, au jour 21, toutes les souris qui ont reçu le vaccin CPD-RBD ont affiché des taux d’immunoglobuline (Ig) robustes contre le RBD viral. De plus, au jour 21, seulement 50% des souris immunisées par le RBD ont révélé une forte réponse humorale spécifique au RBD alors qu’aucun anticorps anti-RBD n’a été trouvé chez deux des 10 souris vaccinées avec la protéine RBD non conjuguée. Ceci a proposé que le RBD ait eu l’immunogénicité modérée.
En outre, la différence dans les niveaux totaux d’Ig anti-RBD entre les deux cohortes vaccinées a diminué aux points de temps ultérieurs. Cependant, les titres d’anticorps correspondant aux souris immunisées par RBD étaient inférieurs à ceux des vaccinés CPD-RBD trois semaines après que les souris ont été vaccinées avec la dose de rappel. Cela a indiqué que la plate-forme iBoost a suscité des réponses d’anticorps anti-RBD plus rapides et plus robustes par rapport au RBD seul.
L’analyse des sous-classes d’IgG a montré qu’au jour 21, les souris immunisées avec CDP-RBD avaient des concentrations sensiblement plus élevées d’IgG3 et d’IgG1 anti-RBD par rapport aux souris vaccinées avec RBD. De plus, l’équipe a noté une tendance à une réponse IgG2 de plus en plus robuste et cohérente parmi les souris immunisées contre le CDP-RBD. En outre, la vaccination avec CDP-RBD, et non non conjuguée avec RBD, a entraîné une plus grande capacité de montage de réponses IgG1, IgG2a, IgG2b et IgG3 complètes. Ainsi, le vaccin CPD-RBD a montré une réponse plus complète contre le SARS-CoV-2 RBD, même sept jours après la vaccination de rappel.
L’analyse avec Sep comme adjuvant du vaccin a révélé que CDP-RBD/Sep induisait des niveaux plus élevés d’IgG totales anti-RBD par rapport au vaccin RBD/Sep, ce qui a également été observé pour CDP-RBD avec Montanide. Cela a indiqué que le CDP était le composant clé qui a stimulé la réponse immunitaire humorale. De plus, un test de neutralisation de substitution a montré que le sérum obtenu à partir du vaccin immunisé contre le CPD-RBD entraînait des niveaux plus élevés d’inhibition de la liaison de l’enzyme de conversion RBD-angiotensine-2 (ACE-2) à partir du jour 21 par rapport au sérum obtenu à partir de souris. qui ont été immunisés avec RBD seul.
Conclusion
Dans l’ensemble, les résultats de l’étude ont montré que la vaccination CPD-RBD a suscité une réponse immunitaire puissante et a également protégé contre les symptômes graves associés au COVID-19.
