L'étude vise à découvrir la base immunologique de la constitution de Tanshi (flegm-dampness) – un type de sous-santé en médecine traditionnelle chinoise (TCM) – en utilisant le séquençage d'ARN unique (SCRNA-SEQ) des cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC). TCM classe les individus en neuf constitutions, avec des tanshi liés à des troubles métaboliques comme le diabète et caractérisés par des symptômes tels que la lourdeur, la lueur abdominale et la peau grasse. En analysant les PBMC de Tanshi et des individus non-Tanshi, la recherche vise à combler la théorie constitutionnelle TCM avec l'immunologie moléculaire moderne, fournissant une base scientifique pour le concept de médecine préventive de TCM.
Treize volontaires adultes ont été recrutés, dont quatre avec la constitution de Tanshi (scores ≥40 via une enquête à 8 questions) et neuf témoins non-Tanshi. Les PBMC ont été isolés de leur sang et le SCRNA-SEQ a été réalisé en utilisant la plate-forme génomique 10X, générant des données transcriptomiques à haute résolution pour 51 196 cellules. Les analyses de bioinformatique, y compris le regroupement cellulaire via UMAP, ont identifié 15 sous-types de cellules immunitaires, telles que les cellules B, les cellules T, les monocytes et les cellules dendritiques. L'analyse comparative a révélé des différences significatives dans la composition des cellules immunitaires entre les groupes.
Les principaux résultats comprennent une réduction notable des cellules T (MAIT) associées aux muqueuses chez les individus de Tanshi, confirmées par tri des cellules activées par la fluorescence (FACS) dans une cohorte de validation indépendante de 10 participants supplémentaires. Les cellules MAIT, essentielles pour l'immunité innée, ont été quantifiées en utilisant une cytométrie à flux multicolore ciblant les marqueurs CD3, TCR Vα7.2 et CD161. Parallèlement, les sujets Tanshi présentaient une proportion accrue de monocytes CD14 + classiques et une tendance vers une diminution des monocytes CD16 + non classiques, avec FACS montrant une réduction significative du rapport cellulaire CD16 + par rapport aux cellules CD14 +.
Des analyses transcriptomiques ont identifié des gènes exprimés différentiellement (DEG) associés à des voies inflammatoires accrues dans les PBMC Tanshi. L'ontologie génétique (GO) a révélé une régulation positive de la signalisation TNFα-NFκB, des composantes de la voie JAK-Stat (par exemple, IL-1β, SOCS3) et des réponses d'interféron (par exemple, IRF1, IFI44L). GSEA a en outre mis en évidence l'activation de « Hallmark_TNFA_SIGNALING via NFKB » et « Réponse d'interféron » ensemble de gènes dans les monocytes classiques et les cellules MAIT. De plus, les gènes liés à l'hypoxie et à l'apoptose ont été enrichis, potentiellement liés à l'apnée du sommeil – une comorbidité courante dans la constitution de tanshi qui induit une hypoxie intermittente.
L'étude valide la théorie constitutionnelle de TCM par des preuves moléculaires, démontrant que les individus de Tanshi présentent un état inflammatoire chronique de bas grade et une dérégulation immunitaire. La réduction des cellules MAIT, précédemment associées aux résultats sévères de Covid-19, s'aligne sur les observations cliniques de la sensibilité potentielle des sujets Tanshi aux maladies infectieuses. L'augmentation des monocytes classiques peut contribuer à l'inflammation métabolique, soutenant l'association entre la constitution de Tanshi et le syndrome métabolique.
Le profilage haute résolution de SCRNA-SEQ permet la caractérisation des changements spécifiques au type cellulaire, surmontant les limites du séquençage d'ARN en vrac en résolvant l'hétérogénéité dans les populations de PBMC. La validation FACS assure la fiabilité des résultats du SCRNA-SEQ, en particulier pour la quantification des cellules MAIT, qui nécessite des stratégies de déclenchement en plusieurs étapes pour exclure la contamination des cellules T γδ. L'intégration du diagnostic TCM avec les technologies omiques modernes établit un cadre pour traduire les concepts traditionnels en informations biomédicales exploitables.
Au-delà de la constitution de Tanshi, cette approche est prometteuse pour étudier d'autres constitutions de la MTC et surveiller les réponses thérapeutiques aux interventions TCM. Par exemple, le SCRNA-SEQ des PBMC avant et après le traitement à base de plantes pourrait élucider comment la TCM module les voies immunitaires. De plus, la combinaison du SCRNA-Seq avec la métabolomique, la microbiomique et les données neurophysiologiques peut démêler les mécanismes holistiques sous-jacents aux théories régulateurs de la TCM de TCM, telles que l'interaction entre le système nerveux autonome et l'immunité mis en évidence dans la recherche sur l'acupuncture.
En résumé, cette étude fournit un instantané moléculaire du paysage immunologique de la Constitution de Tanshi, reliant la philosophie préventive de TCM aux voies biologiques concrètes. En démontrant l'utilité de SCRNA-SEQ dans le décodage de la théorie constitutionnelle TCM, la recherche ouvre de nouvelles voies pour la médecine personnalisée, où le profilage immunitaire pourrait éclairer les stratégies d'intervention précoce pour les risques pour la santé spécifiques à la constitution. En tant que tel, il comble la sagesse ancienne avec la science contemporaine, offrant une base basée sur les données pour faire progresser la TCM à l'ère de la médecine de précision.
