Les professeurs de la Faculté des sciences de la santé alliées de l’Université de Chulalongkorn ont mis au point un kit de test de bandelettes MTB pour le diagnostic de la tuberculose (TB) qui est précis et facile à utiliser, garanti par le prix de l’invention 2023 du Conseil national de la recherche de Thaïlande (NRCT) – ; Un autre espoir de réduire la propagation de la tuberculose en Thaïlande.
La tuberculose est l’une des maladies les plus contagieuses qui continue de défier le système de santé publique aujourd’hui. Bien que l’Organisation mondiale de la santé (OMS) vise à ce que 2035 (les 12 prochaines années) soit l’année de la fin de la crise mondiale de la tuberculose, l’évolution de la maladie reste préoccupante.
La Thaïlande est l’un des 14 pays où l’incidence de la tuberculose est la plus grave. Heureusement, la tuberculose résistante aux médicaments en Thaïlande a été retirée de la liste de l’OMS des pays où l’incidence est la plus élevée. Seuls les cas ordinaires de tuberculose subsistent. »
Dr Panan Ratthawongjirakul, Professeur agrégé, Département de médecine transfusionnelle, Faculté des sciences de la santé connexes, Université Chulalongkorn
La tuberculose est une maladie aéroportée causée par une bactérie appelée « Mycobacterium tuberculosis« . Il se transmet des patients tuberculeux aux autres par de petites sécrétions respiratoires (gouttelettes AKA) qui proviennent de la toux, des éternuements ou de la conversation. Il est facile de se contracter et il se propage rapidement.
« L’un des mécanismes pour aider à mettre fin à la tuberculose consiste à identifier les patients tuberculeux le plus tôt possible pour contrôler et limiter sa transmission », a déclaré l’Assoc. Prof. Dr. Panan à propos du lancement du projet de recherche visant à développer MTB Strip (Mycobacterium tuberculosis Strip) qui est facile à utiliser, facile à lire à l’œil nu et avec des résultats rapides et précis. Plus important encore, le coût ne doit pas être élevé pour le rendre accessible aux systèmes locaux de services de santé publique.
« Si nous pouvons distribuer ce test aux petits hôpitaux du monde entier, nous pourrons identifier les patients tuberculeux en deux heures et dépister rapidement les patients positifs dans le système de traitement. Nous pensons que cela contribuera à réduire le nombre de cas de tuberculose dans notre pays », a déclaré Assoc . Prof. Dr. Panan à propos de l’objectif de l’innovation MTB Strip.
Avantages et inconvénients des méthodes actuelles de dépistage de la tuberculose
Assoc. Le Prof. Dr. Panan a mentionné les divers avantages et inconvénients des méthodes actuelles de dépistage de la tuberculose comme suit :
- L’examen microscopique par coloration acido-résistante est une méthode simple. Cela peut être fait dans un petit hôpital, mais l’inconvénient est une faible sensibilité (la concentration bactérienne minimale requise pour un signal positif lors de l’examen au microscope est de 5 000 à 10 000 cellules dans 1 ml d’expectoration.
- La culture des expectorations est la méthode standard de diagnostic de la tuberculose, mais elle ne peut être effectuée que dans de grands hôpitaux bien équipés. Cette méthode doit être effectuée dans une pièce avec un système de haute sécurité pour éviter qu’elle ne se propage à l’extérieur. Il faut plus d’un mois pour connaître les résultats qui entraîneront un retard de traitement.
- Le génotypage de la tuberculose consiste à prélever les crachats du patient pour extraire et amplifier le matériel génétique qui est ensuite testé par une machine de PCR en temps réel. L’inconvénient de cette méthode est qu’elle est coûteuse et nécessite un laboratoire avec du personnel spécialisé, elle ne peut donc être pratiquée que dans certains hôpitaux.
Sur la base des avantages et des limites de diverses méthodes utilisées pour détecter la tuberculose, l’équipe de recherche a développé le kit de test de bandelettes MTB.
Dépistage de la tuberculose plus rapide et plus facile avec MTB Strip
Le kit de test MTB Strip TB se compose de 2 parties principales : 1. Amplification génétique par amplification isotherme avec des amorces spécialement modifiées et conçues. 2. Détection de matériel génétique à l’aide de bandelettes de test développées, qui sont fabriquées à partir d’usines industrielles certifiées ISO13485 pour la fabrication de dispositifs médicaux.
Assoc. Le professeur Dr Panan a expliqué le processus d’utilisation de ce kit de test « après avoir reçu les expectorations du patient, l’ADN sera extrait et utilisé comme modèle. Nous mettrons une amorce spécialement conçue pour amplifier la quantité de matériel génétique dans l’ADN de l’agent pathogène dans les expectorations du patient avant d’entrer dans le processus d’amplification isotherme en utilisant une technique d’amplification par recombinase polymérase. Cela ne prend que 20 à 40 minutes à 37 degrés Celsius. Ensuite, la bandelette de test développée est plongée dans le matériel génétique amplifié. Les résultats apparaîtront sur la bandelette de test comme des résultats positifs et négatifs comme le test ATK que nous connaissons. »
La principale caractéristique du MTB Strip est sa sensibilité à la tuberculose. Avec une petite quantité de tuberculose dans les crachats, le test peut la détecter et afficher le résultat. De plus, le processus de test prend moins d’une heure et ne nécessite aucun outil spécial.
« Les résultats sont précis jusqu’à 96 % par rapport à la PCR en temps réel et à d’autres méthodes de coloration résistantes aux acides couramment utilisées. Il est important de noter que ce kit est moins cher que les tests de biologie moléculaire car il ne nécessite aucun outil spécial tel qu’un thermocycleur » Assoc. a souligné le professeur Dr Panan.
Le kit MTB Strip utilise le principe d’amplification du matériel génétique sous une seule température constante en conjonction avec une boîte chauffante. Dans un laboratoire typique, ce type de boîtier est déjà disponible. Les petits hôpitaux peuvent également utiliser cette technique.
« Le kit de test MTB Strip TB que nous avons développé permettra à de nombreux petits et moyens hôpitaux existants en Thaïlande de dépister les cas de tuberculose afin que les patients puissent recevoir rapidement un traitement approprié, réduisant ainsi le nombre de cas de tuberculose et la propagation de la tuberculose.
Lutte contre la tuberculose avec la distribution de bandelettes VTT aux provinces
Les prototypes de MTB Strip Test ont déjà été administrés à l’hôpital d’Umphang, dans la province de Tak, en 2019-2020 et les résultats sont bons dans une certaine mesure. Cependant, Assoc. Le Pr Dr Panan n’a cessé de développer des méthodes et des innovations pour réduire le nombre de cas de tuberculose en Thaïlande.
« Bien que le kit MTB Strip fonctionne de manière satisfaisante, nous aimerions tout de même développer plus de sensibilité en facilitant l’utilisation de l’extraction d’ADN comme amorce du kit. »
De plus, Assoc. Le professeur Dr Panan prévoit également d’étendre les tests de dépistage de la tuberculose et des maladies apparentées en développant un kit d’extraction d’ADN et un kit de test de la tuberculose plus faciles à utiliser qui peuvent identifier dès le départ les variantes résistantes aux médicaments de la tuberculose, de sorte que des tests plus spécifiques des directives de traitement peuvent être établies.
« Nous menons actuellement des recherches approfondies sur la modification génétique de la tuberculose en utilisant une nouvelle technique de modification génétique d’un organisme vivant appelée CRISPR Cas-9 Interference pour modifier certains gènes de la tuberculose, rendant l’infection moins agressive et plus sensible aux médicaments antituberculeux. CRISPR Cas-9 Interference peut être utilisé en conjonction avec les médicaments antituberculeux actuels. »
Si l’étude réussit, ce sera un nouveau traitement antituberculeux du futur, que Assoc. Le Prof. Dr. Panan est sûr qu’il contribuera à réduire le nombre de cas de tuberculose pour atteindre l’objectif de l’OMS. Petits hôpitaux intéressés par le VTT Les kits de test de bande peuvent contacter Assoc. Prof. Dr. Panan Rathwongjirakul, Unité de recherche sur le diagnostic innovant de la résistance aux antimicrobiens, Département de médecine transfusionnelle et de microbiologie clinique, Faculté des sciences de la santé alliées, Université Chulalongkorn.
