Dans une étude récente publiée dans PLOS ONEles chercheurs ont comparé l’utilisation de rince-bouche sans éthanol et de rince-bouche contenant de l’éthanol pour des études sur le microbiome oral et ont évalué la stabilité des échantillons de rince-bouche pendant ≤ 10 jours avant le traitement.
Étude: Évaluation du rince-bouche sans alcool pour les études du microbiome buccal. Crédit d’image : JuJae-young/Shutterstock.com
Arrière-plan
Les bactéries présentes dans la bouche ou la cavité buccale jouent un rôle essentiel dans la prévention des maladies humaines. Les échantillons de cavité buccale obtenus à l’aide de bains de bouche contenant de l’éthanol sont couramment utilisés dans la recherche sur le microbiote buccal.
L’éthanol est couramment utilisé comme solvant pour les substances actives et les goûts, ainsi que comme conservateur en raison de ses caractéristiques antibactériennes. Cependant, l’alcool est combustible et inapproprié pour le transport et le stockage à grande échelle.
Les individus peuvent s’abstenir d’utiliser des bains de bouche contenant de l’éthanol en raison de la sensation de brûlure associée et/ou d’autres préoccupations médicales, personnelles, culturelles et/ou religieuses.
De plus, les personnes présentant des contre-indications, telles que les alcooliques actuels ou en rétablissement, les lésions de la muqueuse buccale et les conditions immunosuppressives, devraient éviter l’exposition à l’éthanol. Cependant, il n’est pas certain qu’ils soient appropriés pour les enquêtes sur le microbiote oral.
À propos de l’étude
Dans la présente étude, les chercheurs ont comparé les bains de bouche obtenus à l’aide de bains de bouche avec ou sans éthanol pour l’analyse du microbiome. Ils ont également recherché si les bains de bouche étaient stables pendant ≤ 10,0 jours pour évaluer leur sensibilité au traitement retardé.
L’étude comprenait 40 volontaires, 20 hommes et 20 femmes, recrutés dans le cadre du programme de donateurs de recherche du Frederick National Cancer Research Laboratory pour l’analyse. Chaque participant a fourni deux échantillons de bains de bouche auto-obtenus, l’un utilisant un bain de bouche sans éthanol et l’autre utilisant un bain de bouche contenant de l’éthanol.
Les deux échantillons ont été obtenus sur des jours consécutifs, où 50 % des participants ont fourni des échantillons de rince-bouche sans éthanol le jour initial et des échantillons de rince-bouche contenant de l’éthanol le jour suivant, et vice versa pour la moitié restante des participants à l’étude. Au laboratoire, trois aliquotes de 3,0 ml chacune ont été créées à partir de tous les échantillons.
Parmi les aliquotes, une a été traitée immédiatement et congelée, tandis que les deux autres aliquotes ont été conservées à 4◦C pendant cinq jours et à température ambiante (22◦C) pendant dix jours pour simuler des retards d’expédition avant congélation. L’équipe a extrait l’acide désoxyribonucléique (ADN) après amplification de la région variable 4 (V4) du gène de l’acide ribonucléique ribosomal (ARNr) 16S à l’aide de la réaction en chaîne par polymérase (PCR), du séquençage des amplicons et du traitement à l’aide d’une analyse bioinformatique.
Les deux types de bains de bouche ont été comparés à l’aide de plusieurs mesures du microbiote. De plus, les participants ont rempli des questionnaires pour fournir des données sur la démographie, la santé bucco-dentaire, les pratiques d’hygiène, la santé bucco-dentaire et les antécédents récents d’utilisation d’antibiotiques.
Seuls les individus en bonne santé âgés de 40 à 65 ans sans antécédents de maladies chroniques telles que les maladies cardiovasculaires, respiratoires, rénales, hématologiques ou infectieuses ont été inclus.
De plus, les personnes incluses avaient un ensemble complet de dents, travaillaient au Frederick National Laboratory ou étaient membres de la communauté de Fort Detrick et pesaient ≥ 110,0 livres. Le rince-bouche sans éthanol comprenait du chlorure de cétylpyridinium (0,07 %), de la glycérine, de l’eau, de l’arôme, de la saccharine sodique, du poloxamère 407, du sucralose, du méthylparabène, du bleu 1 et du propylparabène.
Les constituants du rince-bouche contenant de l’éthanol étaient l’éthanol (15 % en poids), la glycérine, l’eau, le polysorbate 80, l’arôme, le chlorure de cétylpyridinium, l’acide benzoïque, le benzoate de sodium, le jaune 5, le bleu 1 et la saccharine sodique.
Résultats et conclusions
L’âge moyen des participants était de 52,0 ans ; 88 % étaient de race blanche, 90 % ont documenté leur état de santé bucco-dentaire comme étant bon à excellent ; 80 % n’ont documenté aucune maladie gingivale ; 55% étaient complètement dentés et 93% des individus avaient signalé des caries dentaires. Parmi les participants, 53 % ont utilisé des bains de bouche ≥ 1,0 fois par semaine au cours du mois précédant l’obtention des échantillons.
Les mesures du microbiote étaient comparables pour les deux types de rince-bouche ; les valeurs du coefficient de corrélation intraclasse (ICC) étaient supérieures à 0,85 pour les mesures de diversité alpha (α) et bêta (β), quel que soit le type de rince-bouche.
Des ICC élevés, supérieurs à 0,75, ont été observés pour les genres les plus abondants (Prévotelle, Streptocoque, Veillonelle, Gemellaet Haemophilus) et embranchements (Patescibactéries, Firmicutes et Protéobactéries), concernant la comparabilité des deux types de bains de bouche.
Cependant, des différences significatives ont été observées dans l’abondance de quelques taxons microbiens, en termes relatifs, probablement en raison des différences dans la composition chimique des bains de bouche. De plus, les deux types de bains de bouche étaient très stables malgré les retards de traitement, sur la base des mesures de la diversité α et β et de l’abondance des 4,0 genres et espèces les plus nombreux, en termes relatifs.
Les résultats ont indiqué que les performances du rince-bouche sans éthanol étaient comparables à celles du rince-bouche contenant de l’éthanol dans la collecte des bains de bouche et l’analyse du microbiote oral, et les deux types de rince-bouche étaient stables sans congélation pendant 10,0 jours avant le traitement.
La propriété antimicrobienne du chlorure de cétylpyridinium, présent dans les deux types de bains de bouche, a probablement inhibé la croissance bactérienne dans les bains de bouche échantillonnés, conférant une grande stabilité aux bains de bouche pendant les retards de traitement.
Les rendements médians d’ADN pour les bains de bouche avec et sans éthanol étaient de 1 803,0 ng et 1 343,0 ng, respectivement. Les rendements médians en ADN pour les échantillons immédiatement traités, stockés pendant cinq jours et stockés pendant dix jours étaient respectivement de 1 517,0 ng, 1 636,0 ng et 1 539,0 ng. Les rendements médians d’ADN les premier et deuxième jours de prélèvement d’échantillons étaient de 1 375 ng et 1 723 ng, respectivement.
Des différences significatives ont été observées concernant les variants de séquence d’amplicon (ASV) entre les deux types de bains de bouche ; les ASV médianes pour les bains de bouche sans éthanol et contenant de l’éthanol étaient médianes de 116 et 124, respectivement.
Les valeurs médianes de l’indice de Shannon dans les échantillons correspondants étaient de 4,46 et 4,50, respectivement. Cependant, les valeurs de diversité phylogénétique (PD) de Faith pour les deux types de bains de bouche ne différaient pas significativement. Des résultats similaires ont été observés pour les échantillons stockés pendant dix jours avant le traitement.
Sur la base des résultats de l’étude, les bains de bouche sans éthanol sont appropriés pour obtenir et transporter des échantillons de lavage buccal afin d’analyser le microbiote buccal.
