L’adage « Voir, c’est croire » était à l’esprit du Dr Chih-Wei Logan Hsu et du Dr Joshua D. Wythe du Baylor College of Medicine alors qu’eux et leurs collègues développaient une technologie innovante appelée EZ Clear. Cette nouvelle méthode de compensation des tissus a simplifié et accéléré le processus pour rendre les tissus optiquement transparents, ce qui permet l’imagerie 3D de tissus entiers intacts ou même d’organes entiers.
Leur nouvelle méthode, publiée dans la revue eVie, a été développé à l’Optical Imaging and Vital Microscopy Core (OiVM) de Baylor. La compensation des tissus et l’imagerie d’organes entiers ont révolutionné la biologie, permettant l’exploration d’organes dans un espace tridimensionnel sans compromettre l’architecture tissulaire.
« Les méthodes précédentes étaient compliquées, laborieuses et nécessitaient souvent des équipements coûteux, ainsi que l’utilisation de solvants organiques dangereux, ce qui empêchait l’adoption généralisée de ces méthodes », a déclaré Hsu, codirecteur de l’OiVM et professeur adjoint de physiologie intégrative et l’éducation, l’innovation et la technologie chez Baylor. « Ces difficultés nous ont motivés à développer un processus de compensation plus simple que les utilisateurs pourraient plus facilement compléter, économisant du temps et des ressources précieuses pour se concentrer sur les questions réelles qu’ils souhaitent étudier dans leurs systèmes. »
« La beauté de cette méthode est que vous pouvez analyser l’échantillon d’un point de vue global ou macro sans perturber physiquement l’organisation naturelle du tissu ou de l’organe », a déclaré Wythe, professeur agrégé de physiologie intégrative et de neurochirurgie à Baylor. Il est également membre du Dan L Duncan Comprehensive Cancer Center et du Cardiovascular Research Institute.
Par exemple, les chercheurs peuvent désormais visualiser les connexions neuronales entre l’œil et le cerveau. S’il était effectué par sections, le processus perturberait l’organisation naturelle des tissus et serait incroyablement difficile à reconstruire en 3D, ce qui limiterait notre compréhension des connexions entre les neurones et les autres cellules environnantes sur des volumes ou des zones plus importants. L’imagerie 3D contourne ces limitations, et l’avènement d’EZ Clear rend l’imagerie 3D accessible à la plupart des laboratoires de biologie moléculaire modernes. »
Dr Joshua D. Wythe, Baylor College of Medicine
EZ Clear préserve également les méthodes de marquage endogènes et synthétiques, telles que la fluorescence, sans modifier la taille de l’échantillon. L’étude montre une compensation et un marquage réussis des neurones et des vaisseaux sanguins dans le cerveau, ainsi que des vaisseaux dans les yeux, le cœur, les reins, les testicules et les ovaires, et une compensation réussie des organes entiers des poumons, du foie et du pancréas de souris.
« EZ Clear élimine les barrières techniques précédentes, permettant aux chercheurs d’inspecter leurs organes d’intérêt à partir d’un niveau macro, d’organe entier, jusqu’à une résolution cellulaire », a déclaré Wythe. « Il a éliminé les défis pratiques, de sécurité et économiques précédents, tout en offrant une visualisation reproductible et de haute qualité de l’organe entier, ce qui est une perspective importante car il peut fournir de nouvelles informations sur le sujet étudié. »
EZ Clear est plus rapide, moins cher et plus simple que les méthodes de compensation précédentes. « Les chercheurs peuvent désormais apprendre à l’OiVM ce processus d’élimination des tissus plus facile à réaliser et reproductible. Ils peuvent ensuite le mettre en œuvre dans leurs propres laboratoires et obtenir des résultats en 48 heures en suivant trois étapes simples, alors que d’autres méthodes nécessitent des semaines, voire des mois. nettoyez le tissu », a déclaré Hsu. « Ensuite, ils peuvent apporter l’organe dégagé à l’OiVM pour l’imagerie et l’analyse 3D. »
Parmi les autres contributeurs à ce travail figurent Juan Cerda, Jason M. Kirk, Williamson D. Turner, Tara L. Rasmussen, Carlos P. Flores Suarez et Mary E. Dickinson. Les auteurs sont tous affiliés au Baylor College of Medicine.
