La performance des tests sérologiques disponibles dans le commerce sur des échantillons de patients réels et les corrélats de l'immunité au coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère (SRAS-CoV-2) fournis par les anticorps IgG sont toujours un sujet de débat. Un nouveau bioRxiv Le papier préimprimé contre-interroge les performances de plusieurs tests et proclame le test de neutralisation par réduction de la plaque (PRNT) comme méthode de choix.
Anticorps monoclonal IgG1 (immunoglobuline). Rendu 3D basé sur l'entrée de la banque de données sur les protéines 1igy. Crédit d'image: StudioMolekuul / Shutterstock
La pandémie de la maladie à coronavirus 2019 (COVID-19) causée par le SRAS-CoV-2 a entraîné une évolution rapide des technologies de diagnostic. Actuellement, il n'y a pas de vaccins ou de médicaments disponibles, il est donc question d'utiliser du plasma convalescent à des fins de traitement.
Les tests d'amplification d'acide nucléique (tels que la réaction en chaîne par polymérase ou la PCR) représentent la méthode de choix dans les premières phases de l'infection.
Si du plasma convalescent est utilisé à ces fins, des analyses d'anticorps sensibles et particulièrement hautement spécifiques sont nécessaires. Étant donné que le spectre des signes cliniques du SRAS-CoV-2 est très large et que des infections asymptomatiques sont signalées, pour acquérir des connaissances sur la séroprévalence du SRAS-CoV-2 et pour tester l'immunité individuelle (potentielle), la demande détection d'anticorps, en particulier d'anticorps IgG.
En outre, il est nécessaire de détecter une infection passée pour trouver des corrélats de protection immunitaire de manière adéquate. C'est pourquoi des chercheurs de l'Institut de virologie médicale de l'hôpital universitaire de Goethe et du Centre allemand de recherche sur les infections de Francfort, en Allemagne, ont décidé d'évaluer en profondeur les tests sérologiques disponibles.
« Pour acquérir des connaissances sur la séroprévalence du SRAS-CoV-2 et pour tester l'immunité individuelle (potentielle), il y a une demande croissante dans la détection des anticorps – en particulier des anticorps IgG », déclarent-ils dans leur article.
Sommaire
Pot-pourri viral pour la mesure des performances
Les chercheurs ont prélevé des échantillons de plasma ou de sérum de suivi sur un total de 69 personnes infectées par le SARS-CoV-2 diagnostiqué par PCR à différents moments. La plupart des échantillons ont été prélevés sur des patients atteints d'une maladie modérée à sévère qui avaient besoin d'un séjour à l'hôpital.
Les échantillons d'individus infectés par le coronavirus humain endémique, le cytomégalovirus et le virus Epstein-Barr ont été utilisés pour évaluer la réactivité croisée potentielle et le risque de résultats faussement positifs. De plus, des échantillons de suivi de patients infectés par le SARS-CoV d'origine lors de l'éclosion de 2003 ont également été utilisés.
En se concentrant sur les anticorps IgG, les performances des tests de diagnostic ont été analysées pour les tests de flux latéral (les cassettes de test rapide FasStep), les tests ELISA ou immunosorbés liés aux enzymes (Euroimmun SARS-CoV-2 IgG ELISA et Vircell COVID-19 ELISA IgG), test d'immunofluorescence (IFA) et PRNT.
Les principaux résultats de performance étaient la sensibilité (la capacité d'un test à identifier correctement les patients avec des anticorps COVID-19) et la spécificité (la capacité d'un test à identifier correctement ceux sans anticorps).
Tester la sensibilité / spécificité dans des conditions réelles
Au début de l'infection (c'est à dire., entre 5 et 9 jours après une infection confirmée par PCR), l'IFA et le PRNT développés en interne ont montré une sensibilité de 76,5%, le Vircell ELISA une sensibilité de 70,6%, la sensibilité Assure Tech Rapid Test de 62,5% et l'EuroAmun ELISA une sensibilité de 58,8%.
Ces pourcentages ont augmenté à plus de 90% pour la période d'infection suivante (c'est à dire., des jours 10 à 18), atteignant 100% lorsque les tests Vircell ELISA, IFA en interne et Assure Tech ont été utilisés. Les résultats de spécificité pour Vircell ELISA, IFA interne et Euroimmun ELISA étaient respectivement de 83,3%, 86,4% et 96,2%.
Pratiquement tous les échantillons testés positifs dans des tests disponibles dans le commerce ont montré des propriétés neutralisantes dans le PRNT (avec des titres supérieurs à 1:20), stipulant une immunité protectrice potentielle.
Ceci est important, car certains chercheurs mettent en garde contre les tests d'anticorps à grande échelle pour l'élaboration de politiques jusqu'à ce que nous comprenions la proportion exacte de patients COVID-19 avec des anticorps neutralisants.
Cohérence et considérations pratiques
En termes de sensibilité, les données obtenues par le groupe de recherche allemand sont cohérentes avec les résultats publiés précédemment. Un problème est que le titre nécessaire pour une immunité protectrice potentielle n'est pas encore officiellement défini. En outre, il existe des preuves que l'immunité à médiation par les cellules T joue un rôle dans COVID-19 (aux côtés de l'immunité humorale).
L'avantage des analyses de flux latéral est qu'elles peuvent être utilisées par du personnel moins expérimenté dans un environnement de point de service, fournissant des résultats dans un délai relativement court. Néanmoins, les corrélats de l'infection virale ne peuvent être détectés dans certains échantillons qu'en utilisant l'IFA et le PRNT comme étalon-or.
Remarques finales
Bien qu'une réactivité croisée ait été observée avec des échantillons de SRAS-CoV de l'épidémie de SRAS en 2003 avec IFA et Vircell ELISA, cela est de moindre importance puisque ce virus est éradiqué. Néanmoins, des efforts supplémentaires devraient être faits pour améliorer encore la spécificité des tests disponibles, car tout résultat faussement positif fournit un faux sentiment de sécurité.
« Tous les tests examinés dans notre étude sont éligibles pour la détection des anticorps IgG anti-SRAS-CoV-2, indiquant une immunité protectrice potentielle », soulignent les auteurs de l'étude dans leur article.
« Idéalement, pour obtenir la sensibilité maximale, les tests doivent être effectués dans la phase ultérieure de l'infection (≥ 10 jours) après confirmation par PCR ou apparition de la maladie de COVID-19 », ajoutent-ils.
Cette étude a montré que l'IFA, le Vircell ELISA et le PRNT avaient la sensibilité la plus élevée parmi notre armamentarium de diagnostic. Pourtant, le PRNT est actuellement encore la méthode de choix pour les débats concernant l'immunité potentielle au SRAS-CoV-2; par conséquent, elle doit être effectuée lorsqu'elle est disponible.
*Avis important
bioRxiv publie des rapports scientifiques préliminaires qui ne sont pas évalués par des pairs et, par conséquent, ne doivent pas être considérés comme concluants, orienter la pratique clinique / les comportements liés à la santé, ou traités comme des informations établies.
