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Actualités médicales

Biotium présente une nouvelle gamme d’anticorps pour la détection des exosomes

Figure 1. EC-purified MCF-7-derived exosomes were stained with ExoBrite™ CD9 560/585 Flow Antibody (left). Specific staining was seen, compared with the same antibody in buffer (right). Exosomes were detected on a CytoFLEX LX flow cytometer in the PE channel. To download image, please click here

Figure 1. Des exosomes dérivés de MCF-7 purifiés par EC ont été colorés avec l’anticorps ExoBrite™ CD9 560/585 Flow (à gauche). Une coloration spécifique a été observée, comparée au même anticorps dans un tampon (à droite). Les exosomes ont été détectés sur un cytomètre en flux CytoFLEX LX dans le canal PE.

Biotium, l’un des principaux fournisseurs et inventeurs de sondes cellulaires fluorescentes pour la recherche en sciences de la vie, annonce la sortie de nouveaux conjugués d’anticorps ExoBrite™. Ces anticorps ont été sélectionnés spécifiquement pour une détection optimale des marqueurs d’exosomes CD9, CD63 et CD81 dans des exosomes isolés ou des extraits d’exosomes avec peu ou pas de fond. Les conjugués d’anticorps ExoBrite™ sont disponibles dans des formulations pour la cytométrie en flux et le transfert Western.

Les vésicules extracellulaires (EV), y compris les exosomes, sont de plus en plus étudiées pour leur rôle dans la communication cellulaire et en tant que cibles potentielles pour les applications de diagnostic et d’administration de médicaments. Les protéines les plus couramment utilisées comme marqueurs d’exosomes sont CD9, CD63 et CD81, membres de la famille des tétraspanines. Bien que des anticorps ciblant ces protéines soient disponibles auprès de fournisseurs commerciaux, peu sont validés ou fonctionnent bien pour la détection des véhicules électriques ou des exosomes. Les conjugués d’anticorps ExoBrite™ Flow et les conjugués d’anticorps Western ExoBrite™ ont été développés par les scientifiques de Biotium pour une détection optimale des marqueurs d’exosomes CD9, CD63 et CD81 pour la cytométrie en flux et le transfert Western.

Les anticorps anti-flux ExoBrite™ sont conçus pour la détection des véhicules électriques isolés ou liés aux billes par cytométrie en flux. Les anticorps sont disponibles en 4 conjugués : ExoBrite™ 410/450 (canal Pacific Blue™), ExoBrite™ 490/515 (canal FITC), ExoBrite™ 560/585 (canal PE avec laser jaune) et ExoBrite™ R-PE ( canal PE). Des contrôles isotypiques sont également disponibles pour chaque conjugué.

Les anticorps Western ExoBrite™ sont conçus pour la détection des marqueurs exosomes dans les extraits EV par Western blot fluorescent proche IR. Les anticorps sont disponibles avec deux colorants fluorescents dans le proche infrarouge, ExoBrite™ 680/700 et ExoBrite™ 770/800, qui offrent un meilleur rapport signal/bruit pour le transfert Western que les colorants émettant de la lumière visible. Un anticorps Western ExoBrite™ pour la détection de la calnexine, une protéine membranaire localisée dans le réticulum endoplasmique qui ne se trouve pas dans les exosomes, est également disponible comme contrôle négatif pour évaluer la pureté des extraits d’exosomes.

Figure 2. Figure 2. Détection Western à l'aide des anticorps Western ExoBrite™ et des lysats de cellules et d'exosomes MCF-7, montrant l'enrichissement en protéines de tétraspanine et l'appauvrissement en calnexine dans les exosomes.  Les transferts ont été colorés avec l'anticorps anti-calnexine ExoBrite™ 770/800 (contrôle négatif d'exosome) plus (A) l'anticorps ExoBrite™ 680/700 CD9, (B) l'anticorps ExoBrite™ 680/700 CD63 ou (C) l'anticorps ExoBrite™ 680/700 CD81 .  Piste M : marqueur protéique.  Piste 1 : 10 ug de lysat cellulaire.  Piste 2 : 1 ug de lysat cellulaire.  Piste 3 : 1 ug de lysat d'exosome.  Les transferts ont été imagés sur un système d'imagerie infrarouge LI-COR Odyssey®.
Figure 2. Détection Western à l’aide des anticorps Western ExoBrite™ et des lysats de cellules et d’exosomes MCF-7, montrant l’enrichissement en protéines de tétraspanine et l’appauvrissement en calnexine dans les exosomes. Les transferts ont été colorés avec l’anticorps anti-calnexine ExoBrite™ 770/800 (contrôle négatif d’exosome) plus (A) l’anticorps ExoBrite™ 680/700 CD9, (B) l’anticorps ExoBrite™ 680/700 CD63 ou (C) l’anticorps ExoBrite™ 680/700 CD81 . Piste M : marqueur protéique. Piste 1 : 10 ug de lysat cellulaire. Piste 2 : 1 ug de lysat cellulaire. Piste 3 : 1 ug de lysat d’exosome. Les transferts ont été imagés sur un système d’imagerie infrarouge LI-COR Odyssey®.

La sortie des conjugués d’anticorps ExoBrite™ s’ajoute à la gamme croissante de solutions optimisées de Biotium pour la recherche sur les exosomes et les véhicules électriques. Biotium propose également des kits de coloration de membrane ExoBrite™ EV qui sont conçus pour une coloration brillante et spécifique d’EV isolés avec peu ou pas de bruit de fond. Les kits de coloration de membrane ExoBrite™ EV sont disponibles avec quatre options de couleur pour les canaux Pacific Blue™, FITC, PE et APC. En savoir plus sur les nouvelles solutions de Biotium pour la recherche sur les véhicules électriques.

À propos de Biotium

Biotium est l’un des principaux fabricants et fournisseurs de réactifs pour les sciences de la vie qui se consacre à la fourniture d’outils fluorescents innovants et de haute qualité qui alimentent la découverte scientifique. Notre équipe collaborative de chimistes et de biologistes expérimentés, qui sont à la pointe de la conception de colorants fluorescents, applique des principes basés sur la chimie pour produire des solutions aux défis non relevés dans les sciences de la vie et la recherche médicale. Depuis sa création en 2001, Biotium a développé plus de 30 technologies brevetées qui ont été concédées sous licence à des sociétés de technologie des sciences de la vie de premier plan dans le monde. Pour plus d’informations, rendez-vous sur www.biotium.com.

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