Comment évaluer la réponse clinique dans le myélome multiple

Dans cet entretien, Cerba Research explique comment ses équipes ont pu évaluer la réponse clinique de patients atteints de myélome multiple (MM) sous traitement par anticorps monoclonaux.

Pourriez-vous brièvement donner à nos lecteurs un aperçu du myélome multiple (MM) ?

Dans le myélome multiple (MM), un type de cancer de la moelle osseuse, les plasmocytes malins sécrètent des niveaux élevés de protéine immunoglobuline monoclonale (protéine M) qui peuvent être détectés par électrophorèse des protéines sériques (SPEP) ou électrophorèse d’immunofixation (IFE).

Les critères de l’International Myeloma Working Group (IMWG) stipulent que les échantillons de sérum des patients doivent présenter des résultats négatifs pour la protéine M par SPEP/IFE afin de déterminer une réponse complète (RC) ou une RC stricte (sCR).

Quel rôle jouent les anticorps monoclonaux et pourquoi sont-ils importants ?

Les anticorps monoclonaux ont démontré une efficacité thérapeutique dans un certain nombre de tumeurs malignes, mais ils peuvent entraver l’interprétation des données IFE. Par exemple, le daratumumab est un anticorps monoclonal (mAb) CD38 IgG1κ en développement clinique pour le traitement du MM⁵ qui a démontré des réponses cliniques qui s’intensifient avec le temps. Cela nécessite l’évaluation de CR/sCR par SPEP/IFE.

Environ la moitié des patients atteints de MM produisent une protéine M IgG1κ. Dans un sous-groupe de patients, le daratumumab ou le complexe daratumumab-anti-idiotype peut co-migrer avec la protéine M endogène. Les concentrations à l’état d’équilibre du daratumumab (dosé à 16 mg/kg par semaine, tous les deux mois, puis tous les mois) sont facilement détectables sur la majorité des tests SPEP et IFE.

Quels sont les principaux objectifs lors de l’évaluation de la réponse clinique dans le MM ?

L’objectif principal est de valider et de mettre en œuvre un test de réflexe d’interférence du daratumumab (DIRA) qui différencie la protéine M du daratumumab, tel qu’évalué par l’IFE, afin d’établir si des tests supplémentaires pour évaluer la CR/sCR sont justifiés (c.-à-d. examen de la moelle osseuse). Pour ce faire, nous acquérons des échantillons de sérum humain de patients atteints de MM (n = 51) provenant d’une source commerciale ou de patients traités par daratumumab dans des essais cliniques (n = 33).

Comment les échantillons cliniques sont-ils évalués ?

Cerba effectue une série de tests IFE sériques à l’aide des kits Maxikit Hydragel 9IF (Sebia Electrophoresis, Norcross, GA) conformément aux spécifications du fabricant.

Des antisérums contre les chaînes lourdes gamma (IgG), alpha et mu des immunoglobulines et les chaînes légères libres et liées kappa (κ) et lambda sont utilisés pour déterminer la protéine monoclonale présente dans chaque échantillon.

Nous incubons ensuite des échantillons de sérum pour les patients traités au départ et au daratumumab avec ou sans mAb anti-idiotype (souris-anti-huMaxCD38 ; clone 5-3-9-4) à température ambiante pendant 15 minutes avant d’analyser avec IFE en utilisant IgG et Igκ antisérums.

Pour montrer que l’anticorps anti-idiotype se lie et déplace le daratumumab sans avoir d’effet sur la détection et la migration de la protéine M endogène, des échantillons de sérum disponibles dans le commerce provenant de patients atteints de MM (n = 51) ont été dopés avec du daratumumab, un anti-idiotype ou du daratumumab + anti-idiotype (500 et 1000 µg/ml ; rapport 1:1) IgG et Igκ), puis ont été analysés par IFE pour évaluer les changements dans la migration de la protéine M.

Quels sont les autres éléments clés de l’analyse qui doivent être déterminés pour juger si l’évaluation est efficace ?

Il y a plusieurs facteurs que nous devons considérer. La limite inférieure de détection (LOD) est déterminée en évaluant le daratumumab ± anti-idiotype sur une plage dynamique cliniquement pertinente pour établir la concentration la plus faible détectée par ≥1 paramètre (daratumumab igg, daratumumab + complexe anti-idiotype IgG, daratumumab Igκ, daratumumab + anti -idiotype Igκ pour IFE ; daratumumab ou daratumumab + anti-idiotype par SPEP).

Nous assurons alors la reproductibilité. Nous avons effectué trois analyses indépendantes de 10 échantillons de patients traités par daratumumab qui avaient atteint une RP ou mieux et une protéine M ≤ 5 g/dl. Ces essais ont été effectués à l’aide de DIRA, et les résultats (DIRA-positif ou DIRA-négatif) ont ensuite été évalués pour la reproductibilité. Enfin, deux examinateurs indépendants vérifient et interprètent tous les résultats pour vérifier la concordance.

Une fois l’évaluation DIRA terminée, que pensez-vous trouver dans les résultats ?

Dans un cas spécifique, la matrice DIRA a utilisé le daratumumab ± anti-idiotype comme contrôle de la migration de l’anticorps thérapeutique et des couples décalés daratumumab-anti-idiotype.

Les sérums de référence et post-traitement ± anti-idiotype ont ensuite été comparés pour déterminer si la protéine M restait après le changement de daratumumab. Les résultats positifs au DIRA, dans ce cas, ont montré la protéine M, tandis que les résultats négatifs au DIRA n’ont montré qu’un changement dans le daratumumab mais pas de protéine M restante (pistes 8, 12 ; Figure 4).

Nous avons également déterminé la limite inférieure de détection (LOD) dans les échantillons de sérum MM, en utilisant l’IFE à 100 µg/ml dans 9 des 10 échantillons par ≥1 paramètre et à 200 µg/ml dans 10 des 10 échantillons. Dans les mêmes échantillons analysés par SPEP, le daratumumab et le complexe daratumumab plus anti-idiotype ont pu être identifiés à 100 µg/ml dans 3 échantillons sur 10 et à 200 µg/ml dans 10 échantillons sur 10.

Dans 10 échantillons de patients traités au daratumumab sur 10 (100 %), les résultats étaient cohérents dans les trois essais indépendants, démontrant un niveau suffisant de reproductibilité et de concordance DIRA.

Qu’est-ce qui fait de DIRA une bonne méthode pour évaluer la réponse clinique dans le myélome multiple ?

DIRA permet l’identification des réponses cliniques. Dans une étude, un total de 33 échantillons de patients traités par daratumumab provenant de plusieurs études différentes ont été évalués pour une réponse clinique à l’aide de DIRA ; 13 patients (39 %) étaient négatifs pour DiRA, dont 10 ont été confirmés comme ayant obtenu une RC basée sur la moelle osseuse et le FLC tandis que 20 (61 %) étaient positifs pour DIRA, ce qui signifie qu’ils continueront à être surveillés.

Comme mentionné, le DIRA est une méthode spécifique et reproductible qui permet de confirmer l’interférence du daratumumab sur l’IFE sérique à 100 à 200 µg/mL. De plus, le statut DIRA négatif signale que des tests supplémentaires sont nécessaires pour vérifier les critères de réponse CR/sCR et IMWG peuvent nécessiter une modification à mesure que les mAb reçoivent l’approbation pour le traitement du MM.

Figure 1. Les cellules MM sécrètent des niveaux élevés de protéine M détectables par SPEP. Crédit d’image : Recherche Cerba

Figure 2. Les anticorps thérapeutiques peuvent interférer avec la capacité de confirmer les résultats cliniques plus profondément que de très bonnes réponses partielles. Crédit d’image : Recherche Cerba

Figure 3. Présentation schématique des échantillons de patients traités au daratumumab DIRA-positif et DIRA-négatif. Crédit d’image : Recherche Cerba

Figure 4. Exemple d’échantillons de patients traités au daratumumab DIRA-positif et DIRA-négatif. Crédit d’image : Recherche Cerba

Figure 5. Spécificité du MAb anti-idiotype. Crédit d’image : Recherche Cerba

Figure 6. Reproductibilité des résultats DIRA entre des expériences indépendantes. Crédit d’image : Recherche Cerba

Tableau 1. Concordance des évaluations des examinateurs entre les expériences. Source : Recherche Cerba

Dara, daratumumab ; anti-identité, anti-idiotype ; oui, oui ; n, non ; VgPR, très bonne réponse partielle.

À propos de Cerba Research

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