*Avis important: bioRxiv publie des rapports scientifiques préliminaires qui ne sont pas évalués par des pairs et, par conséquent, ne doivent pas être considérés comme concluants, guider la pratique clinique/les comportements liés à la santé, ou traités comme des informations établies.
Dans une récente étude publiée sur bioRxiv* serveur de pré-impression, les chercheurs ont testé trois protéases principales du coronavirus 2 (SRAS-CoV-2) du syndrome respiratoire aigu sévère de nouvelle génération (Mpro) inhibiteurs, c’est-à-dire le nirmatrelvir, l’ensitrelvir et le FB2001, à l’aide d’un nouveau test cellulaire.
Les chercheurs ont démontré que ces médicaments contre la maladie à coronavirus 2019 (COVID-19) peuvent être efficaces contre les variants du SRAS-CoV-2 résistants au nirmatrelvir.
Sommaire
Arrière-plan
Paxlovid, dont le composant actif est le nirmatrelvir, est un SARS-CoV-2 Mpro inhibiteur largement utilisé comme médicament COVID-19. Cependant, les scientifiques craignent que, comme d’autres antiviraux et vaccins, le SRAS-CoV-2 ne donne également naissance à de nouvelles variantes susceptibles de résister au nirmatrelvir. Plusieurs études ont déjà trouvé plusieurs mutations candidates à la résistance au nirmatrelvir.
Par conséquent, bien qu’il soit urgent d’évaluer l’impact potentiel de ces mutations, les chercheurs travaillent également activement pour développer de nouveaux Mpro-médicaments inhibiteurs avec différents mécanismes de résistance aux médicaments.
Plusieurs substitutions d’acides aminés simples, par exemple, T21I, dans les variants du SRAS-CoV-2 montrent une résistance insignifiante aux trois médicaments, à savoir le nirmatrelvir, l’ensitrelvir ou le FB2001. M49L et M49I confèrent une résistance sélective à l’ensitrelvir, tandis que A173V confère la même résistance au nirmatrelvir. De même, ∆P168 induit une résistance comparable contre l’ensitrelvir, ou FB2001, et une résistance synergique au nirmatrelvir en association avec A173V.
D’autres mutations confèrent également une résistance à ces médicaments. Par exemple, L167F et S144A présentent le plus de résistance à l’ensitrelvir, suivis du nirmatrelvir et du FB2001. En revanche, E166V et E166V avec L50F déclenchent une résistance plus élevée au nirmatrelvir, suivi de l’ensitrelvir. Cependant, sa résistance au médicament FB2001 était extrêmement faible.
À propos de l’étude
Dans la présente étude, les chercheurs ont utilisé un panel élargi de Mpro mutants simples et doubles pour déterminer les profils de résistance du nirmatrelvir, de l’ensitrelvir (Xocova) et du FB2001, un médicament COVID-19 potentiel de nouvelle génération. De plus, ils ont utilisé un système de gain de signal comme métrique quantitative pour Mpro Fonctionnalité. Avec une approche guidée par l’évolution et la structure, ce test a caractérisé les mutations candidates de résistance au nirmatrelvir et à l’ensitrelvir dans les cellules vivantes.
Le système de gain de signal utilise une expression plus élevée du SARS-CoV-2 M de type sauvagepro pour cliver plusieurs substrats dans les cellules, y compris celui nécessaire à l’expression du gène dépendant de la polymérase de l’acide ribonucléique (RNAPol) II. Toute mutation génétique phénocopie la réactivité à la dose chimique de ce système à l’aide du Src-Mpro-Rapporteur Tat-Luc, résultant en une luminescence faible à élevée. Le test utilisait des constructions variantes de Mpro et affichait une gamme de niveaux de luminescence, qui (en l’absence de médicament) indiquaient des M normaux, faiblement compromis et fortement compromis.pro activité.
Résultats
Cohérent avec in vivo études de résistance aux médicaments utilisant des modèles animaux, le gain de résultats d’analyses cellulaires a suggéré que plusieurs Mpro les variantes pourraient conférer une résistance limitée aux médicaments avec une perte minimale de Mpro fonctionnalité et, par la suite, une meilleure aptitude virale. À l’opposé, ceux qui avaient des mutations E166V nécessitaient des mutations suppressives (par exemple, L50F) pour restaurer Mpro fonction pour une réplication suffisante du SRAS-CoV-2. Quel que soit le mécanisme moléculaire, les trois médicaments, nirmatrelvir, ensitrelvir et FB2001, ont présenté des mécanismes de résistance distincts, que les chercheurs ont appelés « empreintes digitales ».
De plus, FB2001 pourrait conférer une barrière de résistance plus élevée car les chercheurs ont noté qu’aucun des Mpro les variants testés ont conféré une forte résistance à ce médicament. Des études ont montré que les patients souffrent de authentique résistance ou rebond Paxlovid. Avec des formulations appropriées, l’ensitrelvir et le FB2001 pourraient être efficaces dans de tels cas.
conclusion
Pour conclure, le test basé sur les cellules de gain de signal a remarquablement récapitulé les résultats des études utilisant le SRAS-CoV-2 compétent pour la réplication et semble être une méthode sûre et rapide pour les évaluations de la résistance aux médicaments.
À mesure que de nouvelles variantes du SRAS-CoV-2 émergent, l’élargissement du panel de variantes de ce test pourrait aider à évaluer les mécanismes de résistance aux médicaments (« empreintes digitales ») de la prochaine génération de Mpro -candidats médicaments inhibiteurs. Cette stratégie de profilage précoce réduirait les risques de développer des médicaments SARS-CoV-2 sensibles à la résistance croisée. De plus, cela pourrait aider à identifier Mpro inhibiteurs les plus résistants aux mutations virales.
*Avis important: bioRxiv publie des rapports scientifiques préliminaires qui ne sont pas évalués par des pairs et, par conséquent, ne doivent pas être considérés comme concluants, guider la pratique clinique/les comportements liés à la santé, ou traités comme des informations établies.