Les anticorps anti-liaison simplifient la détection et le développement du CAR-T

La thérapie par cellules CAR-T a démontré un succès remarquable dans le traitement des tumeurs malignes hématologiques et se développe maintenant dans des tumeurs solides. Le 1er juin 2025, Le lancet a publié des résultats positifs du premier essai contrôlé randomisé au monde de CLDN18.2 spécifique CAR-T dans un cancer gastrique, dirigé par l'équipe du professeur Lin Shen à l'Université de Peking. L'étude a rapporté une survie sans progression significativement prolongée et une amélioration de 44% de la survie globale. Récemment, le CAR-T a également montré un grand potentiel dans le traitement des maladies auto-immunes telles que le lupus érythémateux systémique et la sclérose en plaques.

Cependant, le développement du CAR-T a longtemps fait face à un défi persistant: chaque nouvelle voiture ciblant un nouvel antigène tumoral nécessite le développement itératif d'un réactif de détection entièrement validé pour confirmer l'expression de la surface de la voiture. Ce processus est non seulement coûteux et prend du temps, mais peut également introduire un biais de données en raison de la spécificité insuffisante des anticorps, retardant considérablement les délais du projet.

Pour relever le défi, Sino Biological a développé des anticorps monoclonaux de lapin de liaison anti-Whitlow 218, qui se lie spécifiquement à la séquence de liaison Whitlow 218 (GSTSGSGKPGSGEGSTKG). Les anticorps sont indépendants de la spécificité de l'antigène, ce qui le rend applicable sur plusieurs constructions de voitures et les antigènes cibles.

Qu'est-ce que la structure de la voiture?

Une voiture (récepteur de l'antigène chimérique) est un récepteur génétiquement modifié qui combine la capacité de liaison à l'antigène d'un anticorps avec des capacités d'activation des cellules T. La structure de la voiture comprend quatre composantes principales:

1. Domaine de liaison à l'antigène extracellulaire: La région de ciblage centrale, généralement un fragment variable à chaîne unique (SCFV), conçue pour reconnaître des antigènes spécifiques associés aux tumeurs avec une spécificité élevée.
2. Domaine de charnière: Couvre le domaine de liaison à l'antigène extracellulaire et le domaine transmembranaire, offrant une flexibilité et soutenant une bonne conformation de liaison à l'antigène.
3. Domaine transmembranaire: Ancre la structure de la voiture dans la membrane des cellules T, garantissant la stabilité et la fonctionnalité.
4. Domaine de signalisation intracellulaire: Active la cellule T lors de l'engagement de l'antigène. Il contient généralement la chaîne CD3ζ ou CD3ε dérivée du récepteur des cellules T, ainsi que des domaines costimulants tels que CD28 ou 4-1BB pour améliorer la persistance et l'activité anti-tumorale.

Pourquoi la mesure de l'expression de la voiture est importante?

Le taux positif de la voiture est une métrique critique pour évaluer la puissance du produit CAR-T, influençant directement la reconnaissance cible et l'efficacité cytotoxique. La surveillance de l'expression de la voiture dans le sang ou les tissus périphériques après l'infusion donne un aperçu de in vivo Expansion et persistance, informant la réponse au traitement, la durabilité et le risque de rechute potentiel. La surveillance de l'expression des voitures dynamiques aide également à évaluer l'immunogénicité et la sécurité. Ainsi, un système de détection de voitures sensible, fiable et universel est vital pour développer et évaluer les thérapies des cellules CAR-T.

Actuellement, les produits CAR-T approuvés ciblent CD19 ou BCMA, faisant de la cytométrie en flux avec la protéine BCMA recombinante ou CD19 la méthode de détection standard. Bien que très spécifique, cette approche est limitée aux cibles uniques et ne convient pas au dépistage du CAR-T et au développement préclinique.

Plusieurs méthodes de détection de voitures ont été développées, notamment la protéine L (qui lie les immunoglobulines) ou les anticorps polyclonaux de liaison au FC. La protéine L se lie uniquement aux chaînes légères Kappa et ne détecte pas les voitures contenant des chaînes lambda. Les anticorps polyclonaux peuvent réagir croisé avec les IgG des patients, provoquant de faux positifs. Les anticorps anti-idiotype offrent une forte spécificité et une sensibilité en ciblant les idiots uniques dans la région de liaison à l'antigène de la voiture, mais ils sont difficiles à développer et à produire.

Une stratégie universelle: mAb de linker anti-voiture

Les anticorps monoclonaux de liaison anti-voiture offrent une stratégie universelle pour la détection de voitures. La plupart des voitures intègrent un domaine SCFV connecté via des lieurs flexibles tels que Whitlow 218 ou G4S. Ces séquences de liens standardisées fournissent un épitope cohérent et bien défini. Indépendamment de l'antigène cible de la voiture (par exemple, CD19, BCMA, Claudin18.2 ou CD22), les anticorps anti-liaison peuvent détecter avec précision l'expression de la voiture, améliorant considérablement l'universalité et la cohérence par rapport aux méthodes de détection spécifiques de l'antigène.

Anticorps anti-218 en liaison: un outil puissant pour la détection efficace de la voiture

Le 218 lieur, connu pour sa bonne flexibilité et sa stabilité, est utilisé dans près de 90% des constructions de voitures à base de SCFV. Décrit pour la première fois par Whitlow et al. En 1993, sa séquence d'acides aminés (GSTSGSGKPGSGEGSTKG) favorise le pliage correct entre les domaines VH et VL, améliorant la stabilité et la fonction SCFV.

Les anticorps ciblant spécifiquement la région de l'éditeur de liens permettent une détection efficace des voitures, offrant cinq avantages clés:

Détecte toute construction de voitures contenant le lieur Whitlow 218, éliminant le besoin de réactifs spécifiques à la cible.

• Plusieurs options de conjugué

Disponible conjugué à FITC ou PE pour la cytométrie en flux. Des conjugués supplémentaires (APC, AF488, AF647, biotine) sont en développement.

Les anticorps monoclonaux de lapin développés en interne démontrent une liaison non spécifique minimale aux PBMC (<0,5%).

• En nitro Et moin vivo compatibilité

Convient pour évaluer l'efficacité de la transfection in vitro et surveiller l'expansion de la CAR-T dynamiquement in vivo.

Réduit le temps et les ressources nécessaires pour le développement et la validation des réactifs personnalisés.

Anticorps monoclonaux de lapin anti-Whitlow 218 de Sino Biological

Sino Biological fournit une gamme diversifiée de produits et services pour la détection des voitures, soutenant le développement de la thérapie cellulaire à base de voitures.