Dans une étude récente publiée dans le IUBMB journal, les chercheurs ont évalué l’association entre le facteur d’activation plaquettaire (PAF) et la protéine de pointe (S) du coronavirus du syndrome respiratoire aigu sévère 2 (SRAS-CoV-2).
Les plaquettes jouent un rôle crucial dans la thrombose et l’homéostasie et leur agrégation a été largement rapportée chez les patients atteints de la maladie à coronavirus 2019 (COVID-19) en réponse au collagène, à la thrombine et à l’adénosine diphosphate (ADP). De plus, diverses études ont rapporté une stimulation du facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α), du facteur plaquettaire 4 (PF4), de l’interleukine 1β (IL-1β) et de l’IL-8 des plaquettes par la protéine S du SRAS-CoV-2.
À propos de l’étude
Dans la présente étude, les chercheurs ont évalué l’effet du vaccin à acide ribonucléique messager (ARNm) COVID-19 sur la réponse d’agrégation du plasma riche en plaquettes (hPRP) humain et si une protéine SSARS-CoV-2 S recombinante pouvait moduler l’agrégation de hPRP induite par PAF.
L’équipe a collecté la fraction V d’albumine sérique bovine (FV-BSA), l’ADP, le PAF, le collagène et le peptide d’activation des récepteurs de la thrombine (TRAP) ainsi qu’une protéine recombinante du domaine de liaison au récepteur SARS-CoV-2 S dérivée de HEK293 (RBD). Les chercheurs ont obtenu des échantillons de sang après une nuit de jeûne d’un total de six femmes en bonne santé avant la vaccination, et trois semaines et cinq mois après la vaccination par l’ARNm du COVID-19. L’analyse de l’étude a été menée après que les volontaires ont signalé la réception de la deuxième dose de vaccin pour évaluer l’impact de l’activation complète du système immunitaire humain.
L’équipe a également prélevé des échantillons de sang comme anticoagulant dans du citrate trisodique et du plasma riche en plaquettes (PRP) par centrifugation. Le culot résultant de la centrifugation a ensuite été recentrifugé pour acquérir du plasma pauvre en plaquettes (PPP). L’agrégation provoquée par différentes concentrations d’ADP, de PAF, de TRAP et de collagène a été évaluée dans le PRP humain à l’aide de l’aggrégométrie à transmission lumineuse. La courbe d’agrégation résultante a été utilisée pour calculer la concentration requise d’un agoniste spécifique pour stimuler 50 % de l’agrégation plaquettaire (EC50).
L’influence de la protéine S du SRAS-CoV-2 sur l’agrégation plaquettaire induite par les agonistes a été évaluée en pré-incubant les plaquettes en présence de la protéine S virale, tandis que différentes quantités d’agonistes plaquettaires ont été ajoutées. Dans certains des tests, la protéine S a été ajoutée lorsque l’agrégation induite par l’agoniste s’est produite ou avant la vague secondaire d’agrégation plaquettaire induite par les agonistes.
L’équipe a également obtenu des échantillons de sang de l’artère principale des oreilles de lapins mâles blancs de type Californie avant d’isoler les plaquettes dans les échantillons. Par ailleurs. Le PAF a été déterminé en soumettant les extraits de PAF extracellulaire et de PAF intracellulaire à une séparation par chromatographie liquide à haute performance (HPLC). Les concentrations de PAF ont été estimées en évaluant l’activité d’agrégation vis-à-vis des plaquettes de lapin lavées (WRP).
Résultats
Les résultats de l’étude ont montré que l’influence de la vaccination contre le COVID-19 sur l’agrégation de hPRP dépendait de l’agoniste. L’équipe a noté que la CE50 Les niveaux de PAF ont été réduits de 83% trois semaines après la vaccination contre le COVID-19, la CE50 Les niveaux d’ADP ont diminué de 29 %, et EC50 niveaux de collagène réduits de 20%. En outre, la CE50 les concentrations de tous les agonistes testés sont revenues à leurs niveaux initiaux après cinq mois. Notamment, l’agrégation de hPRP qui a été induite par TRAP n’a pas été affectée par la vaccination COVID-19.
L’équipe a également observé que l’incubation des plaquettes d’individus non vaccinés pendant 10 minutes avec la protéine S virale ne stimulait pas l’agrégation de hPRP. La préincubation de hPRP pendant une minute avec la protéine S a révélé une réduction dose-dépendante de l’agrégation comprise entre 50% et 90%. Lorsque la protéine S a été ajoutée peu de temps avant la vague secondaire de l’agrégation induite par le PAF, une élimination complète de la phase secondaire s’est produite. D’autre part, lorsque la protéine S a été ajoutée 10 secondes après que différentes agrégations ont été induites par le PAF, il y avait une réduction dose-dépendante de l’agrégation qui variait entre 39 % et 65 %. De plus, la préincubation de hPRP avec la protéine S pendant 10 minutes n’a pas influencé l’agrégation biphasique induite par le PAF.
De plus, l’agrégation induite par l’ADP n’a pas été influencée par la protéine S alors qu’une augmentation de 15 % a été notée lorsque hPRP a été réincubé avec la protéine S pendant une minute. L’équipe a également observé une légère baisse de 13 % de l’agrégation induite par TRAP lorsque hPRP a été préincubé avec la protéine S pendant une minute et lorsque S a été ajouté 10 secondes après TRAP.
De plus, l’équipe a découvert que l’incubation de plaquettes obtenues à partir d’individus non vaccinés avec la protéine virale S pendant 10 minutes n’a pas provoqué d’agrégation de hPRP. De plus, l’agrégation biphasique induite par le PFAF n’a pas été affectée par la préincubation de hPRP avec la protéine S pendant une minute. Cependant, une augmentation de 29 % et 64 % de l’agrégation a été observée lorsque la protéine S a été ajoutée 10 secondes après PFAF et avant le début de la deuxième vague d’agrégation, respectivement.
Dans l’ensemble, les résultats de l’étude ont montré que la vaccination contre le COVID-19 entraînait une augmentation à court terme de la sensibilité plaquettaire, principalement lorsque le PAF était utilisé comme agoniste.
