L'évolution rapide de l'édition du génome CRISPR/Cas a redéfini les possibilités de la thérapie cellulaire et génique, permettant une correction, une perturbation et une régulation précises des gènes associés à la maladie. Pourtant, à mesure que les technologies d’édition du génome passent de l’innovation en laboratoire à l’application clinique, garantir une évaluation solide de la sécurité non clinique est devenu une priorité essentielle.
Cette nouvelle revue, publiée dans Gènes et maladies, par les auteurs de Cell and Gene Therapy Catapult, Guy's Hospital, Royaume-Uni, fournit une évaluation complète des considérations de sécurité non cliniques nécessaires au développement responsable de produits de thérapie cellulaire et génique modifiés par CRISPR/Cas.
L'examen examine systématiquement les risques de sécurité dans ex vivo et in vivo plateformes d'édition du génome, soulignant que les programmes non cliniques doivent aller au-delà de la preuve de concept pour inclure des analyses de toxicologie, de biodistribution, d'immunogénicité, de tumorigénicité et de persistance à long terme. En adoptant une approche réglementaire et basée sur les risques, conforme aux directives de la FDA et de l'EMA, les auteurs soulignent que la conception de l'étude doit être adaptée au produit de thérapie génique spécifique, à la voie d'administration, au tissu cible et à la population de patients prévue.
Les risques génotoxiques associés aux cassures de l’ADN double brin induites par CRISPR sont au cœur de la discussion. La réparation sujette aux erreurs via la jonction d'extrémités non homologues peut générer des insertions, des délétions, des réarrangements chromosomiques involontaires et des réponses aux dommages de l'ADN médiés par p53, enrichissant potentiellement les clones oncogènes. L'examen souligne comment des avancées telles que les variantes Cas haute fidélité, les technologies d'édition de base et d'édition principale peuvent atténuer ces risques en réduisant l'activité hors cible et en minimisant la formation de cassures double brin.
La stratégie de livraison est présentée comme un déterminant majeur de la sécurité. Les vecteurs viraux, notamment les virus adéno-associés, les adénovirus et les lentivirus, offrent un transfert de gènes efficace mais soulèvent des inquiétudes concernant l'immunogénicité, la mutagenèse par insertion et la toxicité liée à la dose. Les approches non virales, en particulier la délivrance médiée par des nanoparticules lipidiques d'ARNm Cas9 ou de complexes ribonucléoprotéiques, sont discutées comme plates-formes émergentes permettant l'expression transitoire de nucléases et des profils de sécurité potentiellement améliorés.
Les auteurs abordent également les défis immunologiques liés à l’origine bactérienne des protéines Cas. Les preuves de la présence d’anticorps anti-Cas9 et de lymphocytes T réactifs préexistants dans les populations humaines soulignent la nécessité d’un dépistage immunitaire, d’une ingénierie des épitopes et d’une surveillance attentive pendant le développement clinique. Intégration de in silico Des outils de conception d'ARN guides, une analyse hors cible basée sur le séquençage de nouvelle génération et une évaluation de la tumorigénicité à long terme sont recommandés pour renforcer la confiance translationnelle.
Collectivement, cette revue positionne l’évaluation de la sécurité non clinique comme une base multidisciplinaire pour l’avancement thérapeutique CRISPR/Cas. En décrivant des stratégies structurées d’atténuation des risques, il fournit une feuille de route pratique pour accélérer les thérapies génomiques vers une application clinique tout en maintenant des normes rigoureuses de sécurité des patients.
