L’éclosion de la pandémie de coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère (SRAS-CoV-2) a mis en lumière les préoccupations concernant les échantillons de sperme pour la cryobanque.
Le SRAS-CoV-2 utilise le récepteur hôte de l’enzyme de conversion de l’angiotensine 2 (ACE2) et des cofacteurs cellulaires tels que TMPRSS2 pour pénétrer dans les cellules cibles. La virémie transitoire pendant l’infection par le SRAS-CoV-2 et l’expression de TMPRSS2 et d’ACE2 dans les testicules et d’autres glandes accessoires peuvent entraîner l’excrétion du SRAS-CoV-2 dans l’appareil reproducteur masculin.
Arrière plan
Bien que la réplication du SRAS-CoV-2 ne se produise généralement pas dans le système reproducteur masculin, certaines cellules mâles spécifiques peuvent agir comme réservoirs viraux à la suite d’une infection systémique par le SRAS-CoV-2.
De plus, les échantillons de sperme pourraient être contaminés par le SRAS-CoV-2 lors de la collecte de sperme. La possibilité de SARS-CoV-2 dans les échantillons de sperme cryoconservés est un sujet de préoccupation pour les patients qui suivent un traitement avec la technologie de procréation assistée (ART) et la préservation de la fertilité.
Auparavant, quatre études ont indiqué la présence du génome du SRAS-CoV-2 dans des échantillons de sperme. Trois de ces études ont utilisé des tests commerciaux de réaction en chaîne par polymérase de transcription inverse (RT-PCR) pour évaluer des échantillons de sperme, tandis qu’une n’a pas décrit le mécanisme de détection du virus.
Cependant, ces études portaient sur une petite population et n’incluaient pas de méthode validée pour détecter le SRAS-CoV-2 dans les échantillons de sperme. De plus, la plupart des études ont utilisé des tests RT-PCR commerciaux approuvés uniquement pour les échantillons respiratoires et ciblés uniquement deux ou trois gènes viraux.
Trois études ont utilisé une PCR numérique en gouttelettes (dd-PCR) pour une détection de bon niveau du génome du SRAS-CoV-2. Cependant, le type d’échantillon n’était généralement pas du sperme pour ce processus également. La confirmation de la limite de détection (LOD) doit être faite pour les échantillons de sperme dans de telles études.
Une autre étude a utilisé un «test SpermCOVID» pour la détection du génome du SRAS-CoV-2 dans des échantillons respiratoires, mais pas dans des échantillons de sperme.
Une nouvelle étude dans le Biomédecine reproductive en ligne journal visait à développer un protocole standardisé pour la détection de l’ARN du SRAS-CoV-2 dans les fractions de sperme utilisées pour l’ART. Il s’agissait d’un test RT-PCR haute performance qui utilisait des échantillons de spermatozoïdes et du liquide séminal cryoconservé pour la détection de l’ARN du SRAS-CoV-2. De plus, il a également déterminé l’efficacité de la méthode selon les différentes caractéristiques du sperme.
À propos de l’étude
L’étude impliquait la collecte d’échantillons de sperme de patients ayant subi des analyses de sperme de routine pour l’infertilité, quels que soient les critères cliniques, l’indice de masse corporelle ou l’âge, entre juillet 2020 et mars 2021. Aucun des patients n’a signalé de fièvre ou d’autres symptômes du SRAS. -CoV-2. Ils ont également déclaré n’avoir été exposés à personne présentant des symptômes du SRAS-CoV-2. Par la suite, des analyses de sperme conventionnelles, la détection des leucocytes et l’évaluation ou la morphologie ont été effectuées, suivies de la préparation des échantillons.
Les échantillons normozoospermiques ont été décongelés à 4°C et regroupés pour des tests analytiques. L’extraction de l’ARN a eu lieu à partir de 160 µl de chaque échantillon, suivie de l’amplification du génome du SARS-CoV-2 et de la validation analytique du test SARS-CoV-2 RT-PCR. L’impact de la qualité du sperme sur l’efficacité de la RT-PCR a été analysé. Enfin, des tests de précision et LOD et limite de quantification (LOQ) pour le test SARS-CoV-2 RT-PCR ont été effectués.
Résultats
Les résultats ont indiqué que les tests de précision étaient conformes aux exigences attendues pour les types de sperme à forte concentration d’ARN du SRAS-CoV-2, pour les cibles virales N et ORF1ab et pour les types de sperme à faible concentration d’ARN du SRAS-CoV-2. De plus, le gène S s’est avéré être la cible virale la moins sensible du test, tandis que le gène N était la cible la plus sensible.
Il a été observé que les caractéristiques du milieu cryoprotecteur et du sperme n’avaient pas d’impact sur l’efficacité de la méthode de détection. La LOD a été signalée comme étant de 0,33 copies du génome du SRAS-CoV-2/µl d’échantillon pour le liquide séminal et de 0,23 copies du génome du SRAS-CoV-2/µl pour les spermatozoïdes. Enfin, la LOQ était d’une copie du génome viral/µl de l’échantillon.
Par conséquent, cette étude pourrait déterminer la présence d’ARN du SRAS-CoV-2 dans les spermatozoïdes et le liquide séminal cryoconservés. La méthode était efficace quels que soient les caractéristiques du sperme et le type de sperme. Ainsi, cette méthode peut assurer la sécurité des donneurs de sperme et des patients qui bénéficient de techniques de préservation de la fertilité pendant la pandémie de SRAS-CoV-2.