Une nouvelle étude de validation de principe réalisée par des chercheurs britanniques, actuellement medRxiv * serveur de préimpression, décrit le développement d'un test immuno-enzymatique qui peut être utilisé lorsque des niveaux inférieurs d'anticorps spécifiques du coronavirus du syndrome respiratoire aigu sévère 2 (SARS-CoV-2) sont présents dans les échantillons de sérum et de salive.
La pandémie de la maladie à coronavirus 2019 (COVID-19), causée par le SRAS-CoV-2, a causé des millions de cas et plus de 466 mille décès dans le monde. Bien qu'une infection active soit systématiquement détectée par des tests de matériel génétique viral, cette approche ne peut pas être utilisée une fois que les symptômes ont disparu.
C'est pourquoi les tests d'anticorps entrent en jeu en tant que méthode pratique pour déterminer l'exposition historique au virus, obtenir des informations importantes sur l'état immunologique de l'individu, ainsi que pour mesurer les corrélats de protection contre une réinfection potentielle.
Mais bien que la détection d'anticorps chez les patients hospitalisés atteints de la maladie grave se soit avérée être une tâche assez simple, la détection des réponses chez les personnes atteintes d'infections asymptomatiques et de formes légères de la maladie s'est avérée moins fiable – probablement en raison de la sensibilité sous-optimale et de la compartimentation de l'anticorps réponse.
Par conséquent, des tests sérologiques plus sensibles, évolutifs et spécifiques sont essentiels pour lutter contre cette pandémie et diagnostiquer les complications associées au SRAS-CoV-2 même après la phase active de la maladie.
Cette étude réalisée par des chercheurs de l'Université de Birmingham, de l'Université de Southampton, de l'Université d'Oxford, de la University Nospitals Birmingham NHS Foundation Trust, de Binding Site Group Ltd et du Immunodeficiency Center for Wales, rend compte de l'utilisation d'un test d'anticorps pour détecter les anticorps chez les niveaux de réponse aux anticorps spécifiques du SRAS-CoV-2.
Sommaire
Comment détecter des niveaux inférieurs d'anticorps?
Ce groupe de recherche a développé de manière systémique un test immuno-enzymatique (ELISA) en optimisant différents antigènes et étapes d'amplification. L'utilisation de ce test était acceptable pour les échantillons de sérum et de salive dérivés d'individus infectés par le SRAS-CoV-2 symptomatique et asymptomatique.
Tous les échantillons de cette étude ont été collectés auprès d'agents de santé des University Hospitals Birmingham NHS Foundation Trust dans le cadre de l'étude CoCo, qui est un effort de recherche ambitieux visant à étudier en détail l'immunologie du COVID-19.
Afin de détecter des niveaux inférieurs d'anticorps, les chercheurs ont examiné les réponses à deux protéines virales bien caractérisées: la protéine de pointe exposée en surface (protéine S), qui est ciblée par des anticorps neutralisants, et la protéine nucléocapside (protéine N) comme la protéine virale la plus abondante.
Leur méthode s'est concentrée sur l'application de différentes approches pour discerner le meilleur rapport «signal: bruit», et lors de l'identification de l'approche optimale, le plan était de déterminer la relation entre les anticorps dans le sérum et la salive.
La protéine S trimérique SARS-CoV-2 comme cible idéale
Dans cette méthode ELISA modifiée, une protéine S trimérique totale en comparaison directe avec la protéine N a fourni une meilleure discrimination entre les échantillons positifs et négatifs du SRAS-CoV-2, c'est-à-dire qu'elle peut être utilisée comme un meilleur moyen de séparer entre infecté et non individus infectés.
Dosage immuno-enzymatique ou plaque ELISA, méthode de test d'immunologie en laboratoire. Crédit d'image: Jarun Ontakrai / Shutterstock
De plus, les chercheurs ont découvert que les échantillons provenant de personnes hospitalisées présentaient des réponses en anticorps immunoglobuline G (IgG), immunoglobuline A (IgA) et immunoglobuline M (IgM) plus fortes contre tous les antigènes pertinents, ce qui a renforcé les données disponibles de la littérature médicale.
Cependant, la principale nouveauté était la notion selon laquelle la distribution des sous-classes d'anticorps ne diffère pas en fonction de la gravité de la maladie; par conséquent, la détection combinée des IgG, IgA et IgM peut améliorer la détection des réponses des anticorps dans tout le spectre des présentations de maladies.
De plus, seuls les anticorps IgG, IgA et IgM contre la protéine S sont détectables dans la salive d'individus symptomatiques autodéclarés, mais pas ceux contre la protéine N. De plus, les anticorps dirigés contre la protéine S dans la salive peuvent être identifiés indépendamment des réponses sériques.
Vers la méthode ELISA plus sensible
Ce travail contribuera sans aucun doute à accélérer le développement de techniques ELISA sensibles pour notre armarium de diagnostic; plus précisément, les méthodes ELISA standard basées sur la protéine S de haute qualité peuvent être facilement modifiées pour détecter les réponses des anticorps sériques et salivaires dans le COVID-19 sévère, léger et asymptomatique.
« Comprendre la relation entre les diverses présentations cliniques de COVID-19 et la réponse sérologique qui survient pendant et après l'infection sera d'une importance majeure pour comprendre l'immunopathogenèse de la maladie et sélectionner les traitements appropriés », renforcent les auteurs de l'étude dans leur medRxiv papier.
De même, cela peut servir d'outil supplémentaire pour évaluer l'immunité humorale à court et à long terme contre le SRAS-CoV-2 (en particulier pour le COVID-19 acquis par la communauté) et comprendre la nature des réponses protectrices naturelles et futures induites par le vaccin.
*Avis important
medRxiv publie des rapports scientifiques préliminaires qui ne sont pas évalués par des pairs et, par conséquent, ne doivent pas être considérés comme concluants, orienter la pratique clinique / les comportements liés à la santé, ou traités comme des informations établies.
