Dans une étude récente publiée dans La natureles chercheurs ont signalé l’infection productive et persistante des glandes salivaires (SG) par des virus entériques, avec des titres dans la cavité buccale similaires aux titres intestinaux.
Les virus entériques tels que l’astrovirus, le norovirus (NoV) et le rotavirus se propagent classiquement par la voie fécale-orale ; cependant, leur acide ribonucléique génomique (ARN) a également été détecté dans la salive. Il est essentiel d’évaluer la voie salivaire de transmission du virus entérique, car les virus peuvent se transmettre rapidement par des actions telles que la toux, les éternuements, les baisers et la conversation.
À propos de l’étude
Dans la présente étude, les chercheurs ont fait état de la salive comme moyen de transmission et de la cavité buccale comme site de réplication des virus entériques.
Des souriceaux néonatals (âgés de moins de 10 jours) ont été inoculés par voie orale avec du NoV 1 murin (MNV-1) ou du rotavirus [epizootic diarrhea of infant mice (EDIM)] et la réplication virale a été exprimée en dose infectieuse médiane de culture tissulaire (TCID50) et les valeurs quantitatives de réaction en chaîne par polymérase (qPCR) pour MNV-1 et EDIM, respectivement. Les niveaux d’immunoglobuline A sécrétoire (sIgA) dans l’intestin grêle des chiots ont été surveillés. Les mères mammaires ont été immunocolorées avec des anticorps anti-MNV-1 et anti-EDIM et des protéines non structurelles (NSP) 4 et 5, respectivement.
En outre, l’équipe a étudié si la réplication virale dans les glandes mammaires des mères et l’augmentation rapide des sIgA du lait qui en résultait étaient le résultat de mères infectées par leurs petits nouveau-nés par la voie fécale-orale conventionnelle. Les niveaux d’ARN génomique EDIM dans les glandes mammaires des mères, l’intestin grêle des chiots et les niveaux d’IgAs du lait ont été évalués.
Pour une interrogation plus approfondie du mode de transfert viral, les souriceaux ont été inoculés par voie orale avec EDIM (chiots du groupe A) et ont été remis à leur mère (mère A) pour l’allaitement. À un jour par pouce, les mères ont été remplacées par une mère adoptive (mère B) de la cage contenant les chiots non inoculés (chiots du groupe B). La mère A et la mère B ont respectivement allaité les petits du groupe B et les petits du groupe A. À trois jours par pouce, les animaux des deux cages sont morts et la réplication des virus dans les glandes mammaires des mères et l’intestin grêle des chiots a été mesurée.
En outre, l’équipe a étudié si la salive pouvait être un moyen de transmission du virus entérique aux glandes mammaires des mères pendant l’allaitement, pour lequel des échantillons de salive ont été obtenus à partir de souris inoculées par voie orale avec MNV-1 ou EDIM. De plus, une analyse par immunotransfert a été réalisée avec des anticorps anti-MNV-1 VP et anti-EDIM rotavirus VP6. Les souris ont également été inoculées avec les NoV murins MNV-3, 4, WU23 et CR6.
L’équipe a étudié si les sphéroïdes de cellules SG murines (salisphères) pouvaient être utilisées pour ex vivo études de culture de virus murins. Enfin, ils ont exploré la réplication des NoV humains (HuNoV) dans des lignées cellulaires acineuses et canalaires SG humaines transformées par SV40 telles que NS-SV-TT-AC et NS-SV-TT-DC, respectivement, en utilisant la PCR, l’analyse par immunotransfert à l’aide de NSP 6 ,7 et l’hybridation in situ en fluorescence (FISH).
Résultats
Une réplication intestinale robuste du MNV-1 et de l’EDIM a été observée dans les intestins des chiots, les deux virus culminant entre trois jours après l’inoculation (dpi) et cinq dpi et les virus étant éliminés après sept à 10 jours d’inoculation. Des résultats similaires ont été obtenus chez des souris adultes. L’équipe a détecté une augmentation rapide des titres de sIgA de l’intestin grêle des chiots à partir de trois jours par pouce parmi les chiots inculqués avec EDIM ou MNV-1, ce qui était corrélé à une augmentation rapide des titres de sIgA du lait maternel.
L’isolement des glandes mammaires du barrage a montré un ~ 105multiplication par 1 de l’ARN génomique de l’EDIM et du MNV-1, indiquant la réplication des virus entériques mammaires, ce qui a été confirmé par l’analyse d’immunocoloration. Dans l’analyse d’immunocoloration, les lymphocytes B et les cellules épithéliales de la muqueuse des canaux galactophores ont été identifiés comme sites de réplication du MNV-1 et de l’EDIM, respectivement.
Contrairement aux mères qui ont allaité des nouveau-nés infectés par des virus, aucune augmentation des titres de sIgA n’a été détectée dans le lait des mères inoculées par voie orale en l’absence d’ARN génomique viral détectable dans les glandes mammaires des mères. Au contraire, 106Des niveaux d’ARN génomique fois plus élevés des deux virus ont été détectés dans l’intestin grêle des chiots à quatre jours par pouce.
dix4-fold et 106Des augmentations d’un facteur 1 des niveaux d’ARN viral dans les glandes mammaires (des mères A et B) et les intestins (des chiots des groupes A et B), respectivement, ont été observées, indiquant que les deux mères ont contracté des infections en allaitant des chiots du groupe A ; la mère A a été initialement infectée par des petits du groupe A et la mère B par la suite. Les chiots du groupe B ont très probablement été infectés par les fèces ou les glandes mammaires de la mère A par tétée. Pris ensemble, les résultats indiquent le reflux de virus entériques des petits nouveau-nés vers les mères via l’allaitement, donnant lieu à sur place des infections des glandes mammaires de la mère et une augmentation rapide des titres d’IgA dans le lait qui peuvent avoir contribué à l’élimination de l’infection chez les petits.
Dans l’analyse d’immunotransfert effectuée avec des souris adultes, MNV-1 et EBIM ont démontré une excrétion dans la salive en deux dpi avec 104– fois le TCID supérieur50 valeurs pour MNV-1 ; cependant, les deux virus ont provoqué des infections aiguës qui ont disparu en sept à 10 jours. Au contraire, les NoV murins MNV-3,4 et WU23 ont démontré une infection persistante dans le côlon proximal avec excrétion dans les fèces pendant environ 21 dpi avec un 103– fois l’augmentation des titres.
L’inoculation de MNV-1,3,4 et WU23 a conduit à 104-multiplication des titres viraux correspondants dans les SG sous-mandibulaires (SMG). De même, les SMG de souris inoculées à l’astrovirus et à l’EDI ont montré 103-fold et 105fois les niveaux d’ARN génomique viral, respectivement. Il convient de noter que les virus WU23 et MNV-3,4 ont démontré des titres de réplication comparables dans les SMG et le côlon proximal alors que la réplication de CR6 n’a pas été observée dans les SMG, indiquant des différences de dynamique de réplication parmi les NoV murins.
EDIM et MNV-1 répliqués dans la molécule d’adhésion des cellules épithéliales + (EpCAM+) et le cluster de différenciation 45+ (CD45+) Les cellules SMG et les NoV murins nécessitaient des récepteurs CD300lf pour infecter les SMG. Les salisphères ont démontré une réplication robuste de MNV-1, EDIM et CR6 in vivo. Les virus masqués par des vésicules se sont répliqués efficacement dans les lignées cellulaires humaines SG.
Conclusion
Dans l’ensemble, les résultats de l’étude ont mis en évidence la salive comme voie alternative pour la transmission du virus entérique et les lignées cellulaires et sphéroïdes dérivés de SG comme systèmes de production de virus évolutifs. La voie salivaire de transmission des virus entériques peut avoir des implications diagnostiques et thérapeutiques, et des mesures d’assainissement appropriées, en plus de celles visant à prévenir la transmission fécale-orale traditionnelle, sont nécessaires pour limiter la propagation des virus entériques via la salive.
