Dans cet article, Ma Clinique parle au Dr Ivan Krylov de la biodétection et du biotraitement dans la thérapie génique, tout en discutant des différents produits que Sartorius fabrique pour y contribuer.
Sommaire
Pouvez-vous nous donner un aperçu du marché de la thérapie génique ?
Des progrès considérables dans les technologies d’édition et de délivrance de gènes ces dernières années ont conduit au développement rapide de thérapies viables basées sur des stratégies de thérapie génique. À ce jour, la FDA a approuvé neuf produits de thérapie génique pour une utilisation clinique.
En outre, il existe actuellement plus de 100 candidats-médicaments de thérapie génique en essais cliniques pour un large éventail de troubles, notamment les cancers, les affections hématologiques, les maladies oculaires, les maladies neuromusculaires, les immunodéficiences et les troubles rares ou héréditaires. Un pourcentage important de ces thérapies géniques repose sur l’utilisation du vecteur viral adéno-associé (AAV), l’un des vecteurs les plus prometteurs pour la délivrance de gènes.
D’un point de vue financier, le marché mondial de la thérapie génique est évalué à 2,9 milliards de dollars américains, avec un taux de croissance annuel composé prévu d’environ 20 % pour les huit prochaines années.
Malgré la croissance rapide du marché de la thérapie génique, la fabrication de ces produits thérapeutiques reste un défi en raison de la complexité du processus de production.
Chez Sartorius, notre objectif est de simplifier et d’accélérer les progrès dans le domaine des sciences de la vie et des bioprocédés. L’une des solutions que nous proposons utilise l’Octet® La plate-forme d’interférométrie biocouche (BLI) a été développée pour aider à la production d’AAV en simplifiant la mesure du titre de capside d’AAV pendant le biotraitement.
Pouvez-vous expliquer pourquoi le titre de capside d’AAV est important pour le biotraitement dans le développement de la thérapie génique, et quelles sont certaines des technologies utilisées pour quantifier le titre de capside d’AAV aujourd’hui ?
Le vecteur viral adéno-associé est largement utilisé pour la délivrance de matériel génétique en thérapie génique, et le titre de capside d’AAV est un attribut de qualité critique qui doit être surveillé tout au long du développement du processus et du contrôle de la qualité. Le développement et la production d’AAV à l’échelle industrielle nécessitent des méthodes efficaces pour une quantification précise des capsides virales.
Les techniques traditionnelles telles que ELISA, HPLC et ddPCR prennent beaucoup de temps et de main-d’œuvre. Par exemple, la mesure du titre AAV à l’aide d’ELISA nécessite six étapes et peut prendre 3 à 4 heures, et la ddPCR peut prendre 6 heures.
En revanche, sur l’Octet® plate-forme BLI, des résultats similaires pourraient être obtenus en une seule étape et en aussi peu que 15 minutes.
Pour ceux qui ne connaissent pas l’Octet® Plate-forme BLI, pouvez-vous décrire la technologie et son fonctionnement ?
Octuor® Les systèmes BLI permettent une analyse en temps réel et sans étiquette pour la détermination de la cinétique, de l’affinité et de la concentration.
La plate-forme comprend des instruments, des biocapteurs, des réactifs, des kits d’analyse et des logiciels pour la détection et l’analyse des interactions biomoléculaires. Ils sont utilisés tout au long de la découverte, du développement, de la fabrication et du contrôle qualité biothérapeutiques pour simplifier et rationaliser la mesure des attributs des processus et des produits.
L’interférométrie biocouche, ou BLI, est une technologie optique qui utilise des biocapteurs à base de fibre optique recouverts de différentes chimies pour l’immobilisation des ligands. Les systèmes surveillent le changement d’épaisseur de la couche biologique au fil du temps. Une réponse de liaison est mesurée en fonction de l’augmentation de la densité biomoléculaire sur la surface du biocapteur. Seules les molécules se liant ou se dissociant du biocapteur provoquent un signal détectable.
Les mesures qui nécessitent généralement des volumes d’échantillons élevés, une configuration complexe ou un temps et une main-d’œuvre excessifs peuvent être exécutées efficacement et avec un minimum d’effort sur l’Octet® Plateforme BLI. Pour en savoir plus sur cette technologie et visionner une vidéo d’introduction, veuillez visiter notre site Web.
Sartorius a récemment lancé un nouvel Octet® Biocapteur AAVX. Pouvez-vous donner un bref aperçu du produit?
Octuor® Les biocapteurs AAVX fournissent une méthode rapide, sans étiquette et à haut débit pour la mesure du titre de la capside AAV. Ces biocapteurs sont pré-immobilisés avec Thermo ScientificMT CaptureSélectionnerMT Conjugué biotine-anti-AAVX de Thermo Fisher Scientific Inc., qui se lie avec une affinité et une spécificité élevées à divers sérotypes AAV natifs et recombinants, y compris AAV1 à AAV9 et AAVrh10.
En raison de sa grande spécificité, le biocapteur peut être utilisé pour quantifier les capsides d’AAV dans des échantillons de culture cellulaire purifiés et bruts avec un titre compris entre 8,5E8 et 1,0E13 vp/mL pour la plupart des sérotypes.
Quels sont les avantages du nouvel Octet® AAVX Biosensor a-t-il pour la mesure du titre AAV par rapport aux technologies actuelles sur le marché ? Pouvez-vous donner un exemple d’utilisation ?
ELISA a traditionnellement été utilisé pour mesurer le nombre de capsides virales d’AAV et est souvent considéré comme la méthode de choix pour la mesure du titre d’AAV.
L’Octuor® Le test AAVX fournit une solution viable à certaines des limitations associées à ELISA, telles que les faibles ensembles de données fournis par les tests de point final, ainsi que le temps et les efforts considérables nécessaires pour effectuer les mesures.
De plus, l’Octet® La conception du système BLI permet une configuration et une analyse rapides des tests. Un autre avantage clé est que l’analyse des données est affichée en temps réel, ce qui permet de surveiller et d’optimiser chaque étape du dosage.
À titre d’exemple, je vais utiliser les données fournies par l’un de nos clients. Les scientifiques de cette société ont testé trois sérotypes d’AAV, dont AAV8 et AAV9 avec un titre de capside d’AAV de 8,8E8 à 1,0E13 vp/mL ; d’abord les échantillons bruts avec un titre AAV inconnu ont été dilués avec notre Octet® Échantillons Tampon diluant, puis simplement aliquoté dans une plaque d’échantillons à 96 puits, suivi d’un plongeon en une étape de l’Octet® Biocapteurs AAVX. Les données de réponse de liaison ont été analysées tracées sur la courbe standard générée à l’aide d’échantillons de référence standard spécifiques au sérotype. Et le titre AAV dans les échantillons inconnus a été dérivé de la courbe standard. Un bon % de récupération (80–120 %) et une bonne précision (CV < 10 %) ont été observés pour toutes les concentrations testées dans cette plage dynamique. De plus, le client a vu une bonne corrélation entre l'Octet® Dosage AAVX et ELISA.
Octuor® Systèmes BLI, en combinaison avec Octet® Les biocapteurs AAVX offrent une méthode rapide, sans étiquette et à haut débit pour la quantification des capsides d’AAV, fournissant des résultats pour 96 échantillons en aussi peu que 15 minutes et peuvent être utilisés pour quantifier les capsides d’AAV dans des échantillons bruts et purifiés.
Existe-t-il d’autres applications dans l’espace AAV et la thérapie génique qui pourraient être simplifiées avec l’Octet® La plateforme BLI dans le futur ?
Chez Sartorius, nous nous engageons à fournir à nos clients des solutions qui simplifient le progrès. Cela englobe un processus d’amélioration continue où nous écoutons le client, recueillons des informations sur ses besoins et ses désirs, ainsi que sur les évolutions du marché.
Nous utilisons ces informations pour continuer à améliorer les capacités de notre portefeuille existant, ainsi que dans le développement de nouvelles solutions. La thérapie génique étant un marché en croissance et en évolution, je suis convaincu que notre portefeuille évoluera et suivra le rythme des besoins des clients et des tendances du marché.
À propos du Dr Krylov
Ivan Krylov est chef de produit actuellement responsable de l’Octet® Portefeuille de consommables pour l’interférométrie biocouche (BLI). Il a rejoint Sartorius en 2020 et dirige les efforts de l’entreprise pour élargir le portefeuille de consommables avec des produits permettant de nouvelles applications sur l’Octet® Plateforme BLI. Avant ce rôle, Ivan a travaillé dans le développement de produits pendant 10 ans dans des environnements industriels et universitaires, développant des instruments et des consommables pour diverses applications en biotechnologie. Son expérience est vraiment diversifiée et va de la gestion de produits au développement d’essais et à la chimie médicinale. Ivan a obtenu son doctorat en chimie de l’Université de Californie du Sud.
