Dans une étude récente publiée dans la revue Avancées scientifiques, des chercheurs du Royaume-Uni ont étudié les niveaux d’interféron-γ (IFN-γ) dans des échantillons de sang de patients atteints de la longue maladie à coronavirus 2019 (long COVID). Ils ont découvert que les patients atteints de COVID long présentaient des niveaux constamment élevés d’IFN-γ provenant des cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) médiées par les lymphocytes T. De plus, ils ont constaté que l’amélioration des symptômes était corrélée à une diminution de la production d’IFN-γ.
Étude : Libération spontanée, persistante et dépendante des lymphocytes T d’IFN-γ chez les patients qui progressent vers Long Covid. Crédit d’image : Lightspring/Shutterstock
Sommaire
Arrière-plan
Le long COVID, caractérisé par des symptômes persistants et divers après une infection par le coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère (SRAS-CoV-2), manque de critères diagnostiques clairs et de traitements approuvés. Les taux de prévalence varient considérablement en raison de définitions différentes. La gravité de l’infection initiale n’est pas corrélée à la progression vers un COVID long. Alors que certains patients s’améliorent spontanément, beaucoup présentent des symptômes persistants ou qui s’aggravent. Des rapports anecdotiques suggèrent que la vaccination pourrait influencer la progression des symptômes. Cela nécessite des recherches urgentes sur la physiopathologie sous-jacente et les biomarqueurs potentiels du long COVID. Par conséquent, les chercheurs de la présente étude ont analysé la sécrétion de cytokines des PBMC chez les patients atteints de COVID long, les témoins et les survivants d’une infection aiguë pour explorer les mécanismes de la maladie et identifier les marqueurs diagnostiques. Cette approche globale visait à relever les défis du diagnostic et à faire progresser la compréhension du COVID long.
À propos de l’étude
Au total, 54 échantillons de donneurs non exposés ont été obtenus dans le cadre de l’étude ARIA 2019. En tant que contrôles positifs, des patients hospitalisés confirmés par COVID ont été recrutés après un résultat positif de RT-qPCR (abréviation de réaction en chaîne par polymérase quantitative avec transcription inverse) ou une réponse positive de l’interleukine-2 (IL-2) à la membrane (M) et à la nucléocapside (N). ) peptides ou séropositivité aux anticorps envers N. Les patients de l’étude Long COVID (n = 55) ont été recrutés entre août 2020 et juillet 2021, sur la base de symptômes persistant pendant au moins cinq mois après une forme aiguë de COVID-19. Les critères d’exclusion étaient un diagnostic alternatif expliquant les symptômes, l’utilisation récente de médicaments immunomodulateurs, des traitements anti-TNF (abréviation de facteur de nécrose tumorale) pour la polyarthrite rhumatoïde et une chimiothérapie anticancéreuse récente.
Les participants ont fourni 32 ml de sang veineux périphérique pour analyse, des données cliniques ont été obtenues à chaque visite et des tests de laboratoire ont été effectués. La sérologie du SRAS-CoV-2 a été réalisée à l’aide d’une cytométrie en flux multiplex basée sur des particules, en utilisant des protéines recombinantes N et Spike (S) du SRAS-CoV-2 et des protéines du domaine de liaison au récepteur (RBD).
Les PBMC ont été obtenues à partir d’échantillons de sang par centrifugation sur gradient de densité. Les monocytes ont été sélectionnés positivement par tri cellulaire activé magnétique (MACS) avec des microbilles CD14+, CD4+ ou CD8+. Les tests FluoroSpot ont été réalisés en utilisant des anticorps humains IFN-γ et IL-2 ou des anticorps humains IFN-γ, TNF-α ou IL-10. Les cellules immunitaires totales dans les échantillons de sang total ont été quantifiées. À l’aide de la cytométrie en flux, les PBMC de patients atteints d’un long COVID et de témoins sains ont été stimulées et évaluées pour la production d’IFN-γ et l’expression de marqueurs d’activation sur les lymphocytes T CD4+ et CD8+. La sécrétion de cytokines dans les PBMC de patients atteints de COVID long et de témoins sains a été comparée à l’aide de panels d’orage de cytokines COVID-19 et d’un test immuno-enzymatique (ELISA). L’analyse statistique impliquait l’utilisation du test de Shapiro-Wilk, de l’analyse de variance unidirectionnelle de Kruskal-Wallis (ANOVA), du test U de Mann-Whitney et du test de rang signé de Wilcoxon.
Résultats et discussion
Les PBMC de patients atteints de COVID long ont montré un pourcentage nettement plus élevé de cellules productrices d’IFN-γ par rapport aux échantillons témoins négatifs pré-pandémiques non exposés. De plus, les PBMC provenant d’individus atteints d’une infection aiguë par le SRAS-CoV-2 ont montré une production accrue d’IFN-γ 28 et 90 jours après la PCR, qui s’est résolue au bout de 180 jours, contrastant avec la libération persistante d’IFN-γ chez les patients atteints de COVID long au-delà de 180 jours. Toutefois, la production d’IL-2 est restée inchangée. La fonctionnalité des lymphocytes T chez les patients atteints de COVID long est restée intacte, comme en témoigne leur capacité à produire des réponses IL-2 et IFN-γ lors d’une stimulation avec divers antigènes, malgré une production spontanée élevée d’IFN-γ affectant les mesures dans certains cas. Aucune corrélation n’a été observée entre la production spontanée d’IFN-γ et la gravité de la maladie aiguë. La libération non stimulée d’IFN-γ s’est généralement résolue après une infection aiguë, mais a persisté chez les individus ayant développé un long COVID.
Les analyses d’épuisement ont révélé que les cellules CD14+ sont essentielles à la production d’IFN-γ dans les cas de COVID long, tandis que l’élimination des cellules CD56+ n’a montré aucun impact significatif. De plus, les lymphocytes T CD8+, avec une certaine contribution des lymphocytes T CD4+, se sont révélés être la principale source d’IFN-γ dans les cas de COVID long, interagissant principalement avec les cellules CD14+. Il a été constaté que le COVID long était associé à une production accrue d’IFN-γ, ainsi qu’à une légère augmentation du TNF-α et de l’IL-1β. D’autres cytokines comme l’IL-2, l’IL-10 et le GM-CSF n’ont pas montré de changements significatifs.
Les patients atteints de COVID long ont également présenté une augmentation des populations de monocytes, une diminution des lymphocytes T régulateurs et une réduction des cellules NKG2C+ NK (abréviation de Natural Killer). De plus, après la vaccination, ils ont présenté une libération réduite d’IFN-γ non stimulée, en corrélation avec l’amélioration des symptômes et suggérant un lien entre les niveaux d’IFN-γ non stimulés et les symptômes prolongés du COVID.
Conclusion
En conclusion, les chercheurs ont identifié la libération d’IFN-γ comme un biomarqueur potentiel chez les patients atteints de COVID longue, mettant en évidence un mécanisme immunologique potentiel sous-jacent à la maladie. Cette découverte pourrait éclairer et ouvrir de nouvelles voies pour le développement de nouvelles interventions thérapeutiques.
