Des chercheurs canadiens de l’Université McMaster, en Ontario, ont identifié des complexes immuns activateurs de plaquettes dans les troubles de la coagulation associés à la maladie à coronavirus 2019 (COVID-19), la maladie causée par le coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère (SRAS-CoV-2).
Leur étude intitulée «Platelet Activating Immune Complexes Identified in COVID-19 Associated Coagulopathy» a été publiée sur le serveur de pré-impression medRxiv*.
Sommaire
Contexte
L’agent SARS-CoV-2 qui cause le COVID-19 est connu pour être associé à des troubles de la coagulation. La thrombose est fréquemment observée chez les patients gravement atteints de COVID-19, et cela a été appelé coagulopathie associée au COVID-19 (CAC).
Les caractéristiques de la CAC sont similaires à celles de la thrombopénie induite par l’héparine (TIH), montrant des caractéristiques de thrombopénie légère (faible numération plaquettaire) et de thrombose artérielle et veineuse diffuse.
HIT et thrombose
La TIH est une affection caractérisée par des caractéristiques importantes de thrombocytopénie; ceux-ci sont associés au traitement à l’héparine et conduisent à une thrombose. On dit qu’elle est causée par des anticorps spécifiques aux IgG qui ciblent le facteur plaquettaire 4 (PF4). Ces deux complexes forment des complexes appelés complexes immuns (IC). Ces complexes immuns, à leur tour, peuvent activer les plaquettes médiées par le récepteur FcyRIIA. Les complexes immuns ne sont pas le résultat d’anticorps anti-PF4 / héparine spécifiques d’IgG dans COVID-19, mais sont causés par l’activation des cellules endothéliales.
COVID-19 et IC
Des études récentes ont montré que ces complexes immuns sont également associés à un COVID-19 sévère. Cette étude a été entreprise pour voir l’association entre les CI activant les plaquettes chez les patients atteints de CAC.
Étudier le design
Pour cette étude, l’équipe de chercheurs a inclus des échantillons de sang de dix patients gravement malades atteints de COVID-19. Les échantillons ont été analysés au laboratoire d’immunologie des plaquettes de McMaster (MPIL). Pour comparer avec les patients gravement malades, des échantillons de huit patients convalescents positifs au COVID-19 ont également été prélevés. Parmi ceux-ci, cinq appartenaient à des patients atteints de TIH avant la pandémie (groupe HIT). Sept des échantillons provenaient de contrôles sanitaires avant la pandémie (groupe HC).
Les chercheurs ont testé ces échantillons pour HIT et ont rassemblé d’autres détails des patients pour aider à leur évaluation. Celles-ci comprenaient le sexe du patient, la numération plaquettaire (minimum), l’utilisation d’héparine, les événements liés à la thrombose ou à une coagulation anormale, le diagnostic à l’admission et l’issue.
En utilisant un dosage immunologique enzymatique anti-PF4 / héparine, les anticorps anti-PF4 / héparine ont été détectés dans tous les échantillons. Les anticorps IgG, IgM et IgA PF4-héparine ont été quantifiés. Une EIA anti-PF4 / héparine spécifique aux IgG a été réalisée pour les patients positifs. L’activation fonctionnelle des plaquettes a été testée en utilisant un test de libération de sérotonine (SRA) avec de l’héparine (0,1, 0,3 et 100 U / mL). Des anticorps spécifiques IgG, IgA et IgM contre le RBD (domaine de liaison au récepteur) et la protéine de pointe du virus SARS-CoV-2 ont également été testés.
Pour mesurer l’activation endothéliale, les taux d’antigène du facteur de von Willebrand (vWF) ont été évalués à l’aide d’un immunoessai chimioluminescent. L’équipe a évalué l’activité du VWF à l’aide d’un test spécial. Ils ont mesuré l’enzyme métalloprotéinase ADAMTS13 et ont également mesuré l’anticorps anti-ADAMTS13 chez tous les patients. Cela a été fait pour déterminer les changements dans les niveaux d’antigène vWF associés à l’activité ADAMTS13.
Résultats
Les résultats globaux de l’étude étaient:
- Parmi les 6 patients CAC, l’activation plaquettaire a été observée à l’aide du test de libération de sérotonine
- Cette activation plaquettaire a été inhibée lorsque le récepteur FcγRIIA a été bloqué, indiquant une réaction médiée par un complexe immun (IC) spécifique des IgG.
- Cette activation plaquettaire était indépendante de l’héparine; lorsque l’héparine était administrée à des doses thérapeutiques et élevées, l’activation était cependant inhibée
- Ces 6 échantillons CAC étaient également positifs pour les anticorps spécifiques aux IgG contre le domaine de liaison au récepteur (RBD) ou la protéine de pointe du virus SARS-CoV-2
- Il y avait également une activation significative des cellules endothéliales dans ces échantillons, indiquée par une augmentation de l’antigène et de l’activité du vWF. En outre, les patients atteints de thrombose COVID-19 avaient également un antigène vWF élevé et son activité. Ceci n’est cependant pas associé à l’inhibition ou au blocage d’ADAMTS13.
- Il n’y avait aucune indication de purpura thrombocytopénique thrombotique (TTP).
- Aucun des témoins n’avait d’anticorps anti-SRAS-CoV-2
- Le plasma de convalescence de patients non gravement malades atteints de COVID-19 n’a pas activé les plaquettes dans le SRA, malgré des titres élevés d’anticorps anti-SRAS-CoV-2. Cela indique que les anticorps seuls ne sont pas capables d’activation plaquettaire.
- L’activation des cellules endothéliales contribue à la coagulopathie, ont écrit les chercheurs
Les patients CAC avec des anticorps COVID-19 contiennent des CI capables d’activer les plaquettes dans le SRA d’une manière qui est unique par rapport aux CI HIT. (A) sérums de patients CAC (n = 10) comparés aux sérums de patients (B) HIT (n = 5), servant de contrôle, dans le SRA. La libération de 14C-sérotonine a été mesurée en présence de doses croissantes d’héparine ou avec l’addition de IV.3 (inhibiteur de Fc? RIIA). La libération de 14 Csérotonine> 20% est positive dans le SRA (ligne pointillée horizontale). La plupart des sérums de patients CAC (n = 6, trait plein) démontrent une activation plaquettaire indépendante de l’héparine, contrairement aux contrôles HIT classiques. L’activation plaquettaire a été inhibée par IV.3 dans les deux groupes. (C) anticorps IgG, IgA et IgM COVID-19 dans les sérums de patients CAC activant les plaquettes (n = 6). Les anticorps ont été mesurés dans le SARS-CoV-2 ELISA et comprennent la RBD et la spécificité des protéines de pointe. Les valeurs sont présentées sous forme de rapport de la densité optique observée à la densité optique de coupure du test déterminée. Les valeurs supérieures à 1 rapport sont considérées comme positives dans le SARS-CoV-2 ELISA.
Conclusions et implications
L’étude fournit des preuves que les complexes immuns associés au COVID-19 étaient différents des autres troubles graves de la coagulation, y compris le HIT et le TTP. Ainsi, les patients atteints de COVID-19 atteints d’une maladie grave qui développent une thrombose ont des complexes immuns qui activent les plaquettes via la signalisation FcγRIIA. Les patients atteints de thrombose COVID-19 avaient également des niveaux et une activité d’antigène vWF élevés. Cependant, les chercheurs n’ont pas associé cela à une inhibition ou à un blocage d’ADAMTS13. L’équipe a écrit: «Ces CI peuvent produire un état hautement prothrombotique ressemblant à un HIT mais avec des propriétés uniques d’activation des plaquettes».
*Avis important
medRxiv publie des rapports scientifiques préliminaires qui ne sont pas examinés par des pairs et, par conséquent, ne doivent pas être considérés comme concluants, orienter la pratique clinique / les comportements liés à la santé, ou traités comme des informations établies.
