Dans un article récent publié sur bioRxiv* serveur de prétirage, les enquêteurs ont déterminé l’inactivation du virus monkeypox (MPXV) par traitement thermique.
Sommaire
Arrière plan
De nombreux cas de monkeypox ont été documentés dans des pays non endémiques depuis avril 2022. Cette épidémie inhabituelle est associée au MPXV, appartenant au Orthopoxvirus genre et Poxviridae famille. La plupart des cas confirmés, totalisant 31 800 incidents au 9 août 2022, proviennent de la Région européenne de l’Organisation mondiale de la santé (OMS). Les hommes ayant des rapports sexuels avec d’autres hommes déclarant des rapports sexuels récents avec de nouveaux ou de nombreux partenaires sont plus susceptibles d’être infectés.
Un nombre croissant de cas de monkeypox ont été documentés au cours des 50 dernières années dans 10 pays africains et quatre pays non africains depuis l’identification du MPXV en 1958. Il est plus qu’exceptionnel d’avoir autant d’instances de MPXV en dehors de l’Afrique, ce qui souligne la nécessité de comprendre la pathogenèse et la transmission du virus.
Il est essentiel de manipuler des échantillons cliniques et de mener des recherches sur les virus pour combattre et stopper l’épidémie actuelle. Par conséquent, des techniques d’inactivation virale sont nécessaires pour permettre des environnements de laboratoire expérimentaux sûrs.
Une méthode fréquente d’inactivation du virus est le traitement thermique. La chaleur est couramment appliquée aux échantillons biologiques, aux équipements de protection individuelle (EPI), aux équipements hospitaliers, aux matériaux de laboratoire et aux moyens de transport pour rendre les virus inactifs. Actuellement, des informations sur l’inactivation par la chaleur Orthopoxvirus n’est disponible que pour les virus de la variole et de la vaccine. En raison de leurs structures similaires, le MPXV et le virus de la vaccine peuvent être également vulnérables à l’inactivation thermique, comme on l’a vu précédemment avec un agent biocide.
À propos de l’étude
Dans la présente recherche, les chercheurs ont chauffé deux types de milieux enrichis avec deux souches MPXV distinctes à différentes températures généralement utilisées dans les laboratoires pour inactiver les virus pendant des durées variables. Par la suite, l’équipe a utilisé la technique de dosage sur plaque pour évaluer les souches pour l’infectiosité résiduelle.
Les expériences ont été menées en utilisant des lignées cellulaires Vero E6. Parmi les deux souches MPXV utilisées, une provenait du bassin du Congo (désignée LK pour la zone de Lokole), et une autre provenait d’un patient humain en France isolé en juin 2022 (souche MPXV/2022/FR/CMIP désignée CMIP2022). En outre, le virus a été titré à l’aide d’un test de plaque.
Deux types de milieux distincts, à savoir, Viral Transport Media (VTM) et FCS, ont été utilisés pour diluer les souches MPXV de moitié. En outre, 200 ul de chaque échantillon ont été exposés en triple à différentes températures pendant des durées allant de 30 secondes à 90 minutes. Dans un bain d’eau sèche calibré et validé, les échantillons ont été inactivés et refroidis à l’aide de glace. Les chercheurs ont ensuite examiné leur infectiosité par une analyse de plaque.
Les échantillons ont été criblés à des températures de 95°C, 70°C, 60°C et 56°C pour simuler les températures typiques utilisées pour l’inactivation virale rapide et adaptées aux méthodes de biologie moléculaire, inactivant le MPXV avant le diagnostic normalement, inactivation des agents pathogènes à traitement élevé , et les enquêtes sérologiques, respectivement. De plus, chaque expérience a suivi des directives strictes de niveau 3 de biosécurité (BSL3).
Résultats
Les résultats de l’étude ont montré que les deux souches MPXV analysées étaient inactivées dans la plupart des situations, telles que 70°C en moins de cinq minutes et 60°C en moins de 15 minutes. Les exceptions étaient celles exposées à 95°C pendant 30 secondes et à 56°C pendant 30 minutes. Le MPXV est resté infectieux après 30 minutes à 56°C, indiquant qu’au moins une heure d’inactivation thermique est nécessaire pour que les produits sériques rendent les sérums à titre élevé complètement inertes.
Les résultats de la réaction quantitative en chaîne par polymérase (qPCR) ont démontré que le traitement thermique influence faiblement la détection ultérieure de l’acide désoxyribonucléique viral (ADN) par qPCR, avec des déviations du seuil de cycle (Ct) ne dépassant pas 3,46 à 95 °C et 2,09 à 60 °C et 70 °C . Cette inférence impliquait que la proportion significative d’ADN viral restait inchangée parmi les particules virales.
Ces résultats suggèrent que le MPXV était quelque peu sensible à l’inactivation par la chaleur en laboratoire. Ces données pourraient aider le personnel de laboratoire à renforcer leurs protocoles et servir de base pour comprendre les stratégies de survie du MPXV en dehors des hôtes.
conclusion
Dans l’ensemble, les résultats de l’étude ont montré que le MPXV était inactivé à 70°C en moins de cinq minutes et à 60°C en moins de 15 minutes. Il n’y avait pas de variation entre les virus des clades d’Afrique centrale et d’Afrique de l’Ouest. Les observations actuelles pourraient aider le personnel de laboratoire à manipuler le virus dans des conditions de biosécurité optimales et à rationaliser leurs procédures.
Notamment, les auteurs ont mentionné que des expériences supplémentaires sont nécessaires pour évaluer la persistance du MPXV sur différentes matrices à différentes températures et examiner la fonction possible des surfaces contaminées dans la transmission virale.
*Avis important
bioRxiv publie des rapports scientifiques préliminaires qui ne sont pas évalués par des pairs et, par conséquent, ne doivent pas être considérés comme concluants, guider la pratique clinique/les comportements liés à la santé, ou traités comme des informations établies.
