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Une interview avec Unchained Labs

par Ma Clinique
4 septembre 2023
dans Actualités médicales
Temps de lecture : 5 min
Échange de tampon automatisé en sandwich dans les flux de travail de protéines, d'AAV ou de LNP avec Big Tuna

Sommaire

  • Pourriez-vous donner à nos lecteurs un aperçu des principales fonctions de Big Tuna ?
  • Pourquoi les concentrations de sels tampons pH, force ionique, excipients et tensioactifs dans une solution tampon sont-elles si importantes ?
  • Qu’est-ce qui distingue la machine Big Tuna des autres appareils similaires ?
  • Combien d’échantillons Big Tuna est-il capable de traiter au cours d’une analyse expérimentale ?
  • Pourriez-vous expliquer pourquoi l’automatisation de ces processus est si bénéfique ?
  • Que diriez-vous aux utilisateurs qui craignent que l’automatisation de ces processus réduise le contrôle ?
  • Quelle était la mission derrière la conception de Big Tuna ?
  • Pouvez-vous expliquer le processus utilisé par Big Tuna pour supprimer le tampon, et comment cela se déroule ?
  • Pourquoi la personnalisation du processus d’échange de tampons de Big Tuna est-elle bénéfique pour les utilisateurs ?
  • Si vous pouviez dire une chose aux utilisateurs potentiels de Big Tuna de les vendre sur l’appareil, quelle serait-elle ?
  • Pourquoi le nom « Big Tuna » a-t-il été choisi ?
  • À propos des laboratoires déchaînés

Pourriez-vous donner à nos lecteurs un aperçu des principales fonctions de Big Tuna ?

Big Tuna permet un échange automatisé de tampons et une concentration d’échantillons dans la plupart des applications de traitement de biomolécules. En règle générale, l’échange de tampons de l’un à l’autre finit par constituer un goulot d’étranglement, nécessitant de nombreuses étapes et de nombreuses interventions manuelles. Big Tuna a été conçu pour automatiser ce processus afin que les gens puissent faire autre chose.

Pourquoi les concentrations de sels tampons pH, force ionique, excipients et tensioactifs dans une solution tampon sont-elles si importantes ?

La raison est étroitement liée à l’échantillon lui-même. Les biomolécules sont très complexes et ont une stabilité de pliage et une stabilité de performance différentes dans la bonne solution. La bonne solution signifie qu’elle est à une concentration optimale, au bon pH, à la quantité optimale de sel et à la quantité optimale de tensioactifs et d’excipients.

Tout dans cette formulation doit être parfait pour que ce médicament soit un produit : il confère la stabilité et garantit l’efficacité, ce qui est essentiel pour la fabrication, la durée de conservation et enfin la livraison au patient.

Étant donné leur importance cruciale, le développement de la formulation et la confirmation de la stabilité constituent une partie importante du processus de développement de produits biothérapeutiques tels que les traitements par anticorps monoclonaux.

Pour les molécules vectorielles de thérapie génique plus récentes telles que les nanoparticules lipidiques et les AAV, moins de travaux ont été réalisés sur la stabilité de la formulation. À mesure que ces molécules sont évaluées de plus en plus fréquemment pour le développement de médicaments, la compréhension de la stabilité va devenir beaucoup plus critique dans ces domaines.

Qu’est-ce qui distingue la machine Big Tuna des autres appareils similaires ?

Big Tuna peut traiter plusieurs échantillons simultanément dans des volumes de 100 µL à 50 mL, il n’existe donc pas d’appareil équivalent. Il existe des méthodes automatisées pour effectuer un échange de tampon si vous exécutez de gros volumes d’échantillons, et il existe de nombreuses méthodes manuelles lorsque vous travaillez avec de nombreux échantillons dans de petits volumes.

Big Tuna comble cette lacune en permettant d’automatiser à la fois un faible volume d’échantillons et un nombre élevé d’échantillons, tout en garantissant les avantages de s’éloigner pour faire autre chose.

Combien d’échantillons Big Tuna est-il capable de traiter au cours d’une analyse expérimentale ?

Big Tuna peut traiter jusqu’à 96 échantillons en même temps, de 100 microlitres à 450 microlitres. Pour les personnes travaillant avec des volumes légèrement plus importants, compris entre 450 microlitres et 8 ml, Big Tuna peut traiter jusqu’à 24 échantillons à la fois.

Nous avons une nouvelle application sur ce système qui vous permet de réduire un volume d’échantillon beaucoup plus important en un volume plus petit. Vous pouvez analyser jusqu’à environ 50 ml par échantillon, 24 à la fois, et le concentrer jusqu’à 8 ml de chaque échantillon.

Pourriez-vous expliquer pourquoi l’automatisation de ces processus est si bénéfique ?

Les deux principales raisons sont qu’il est plus rapide, qu’il peut être configuré rapidement et qu’il peut être exécuté sans surveillance. D’autres méthodes comme les filtres de centrifugation sont rapides à mettre en place mais vous devez y revenir périodiquement pour ajouter du tampon et les vérifier. La dialyse peut être effectuée sans surveillance, mais elle se déroule généralement pendant la nuit et plus lentement. Les grands avantages sont que vous récupérez du temps et que vos échantillons sont traités plus rapidement.

Big Tuna donne également plus de contrôle sur le processus d’échange de tampons. Comme nous surveillons le volume sur Big Tuna, nous sommes en mesure de prendre en compte les échantillons analysés à différents débits tout en les traitant comme le souhaite l’opérateur.

Que diriez-vous aux utilisateurs qui craignent que l’automatisation de ces processus réduise le contrôle ?

Les personnes habituées à effectuer de nombreux échanges de tampons savent que pour certaines méthodes, certains échantillons prennent plus de temps, que ce soit à cause de la viscosité de l’échantillon, de la concentration de l’échantillon, de la viscosité des tampons utilisés ou même pour des raisons inconnues. .

Nous avons développé Big Tuna avec cette hypothèse à l’esprit. Nous surveillons de plus près ce qui se passe avec chaque échantillon. Big Tuna arrête le cycle à différents intervalles et vérifie le volume, s’assurant qu’il correspond à la méthode souhaitée par le client.

Ensuite, nous ajustons la durée du cycle suivant, en nous assurant que nous atteignons cet objectif et en veillant à ce que les échantillons les plus rapides ne se concentrent pas trop. En fin de compte, nous surveillons beaucoup plus étroitement que les gens ne le feraient manuellement, en particulier pour plusieurs échantillons à la fois.

Quelle était la mission derrière la conception de Big Tuna ?

La mission était de libérer les clients de leur position debout sur le banc. Beaucoup de temps scientifique précieux est perdu, soit à attendre qu’un échantillon soit prêt pendant la nuit, soit à aller et venir vers une centrifugeuse et à effectuer des tâches manuelles simples comme regarder un tube, pipeter un tampon et attendre.

Le processus a été réellement conçu pour permettre aux utilisateurs d’utiliser leur temps plus efficacement et de préparer leurs échantillons plus rapidement pour leur prochaine tâche. Nous avons écouté nos clients pour comprendre leur processus et ce qui est important pour eux lorsqu’ils effectuent ce travail. Nous en avons incorporé une grande partie dans la conception de la plateforme.

Un élément important de cela est le logiciel. Les gens effectuent normalement ce travail manuellement et n’ont pas besoin de travailler avec un instrument autre que peut-être d’appuyer sur quelques boutons. Nous voulions nous assurer que même s’il s’agit d’un système automatisé, les gens puissent apprendre très rapidement ce qu’ils devaient faire pour mettre en place leur expérience.

De cette façon, ils pourraient marcher jusqu’à Big Tuna et se sentir à l’aise pour l’installer à chaque fois.

Pouvez-vous expliquer le processus utilisé par Big Tuna pour supprimer le tampon, et comment cela se déroule ?

Big Tuna imite essentiellement le processus des filtres de centrifugation, sauf que vous n’êtes pas obligé d’être présent. Il utilise l’ultrafiltration pour concentrer l’échantillon et la diafiltration pour l’échanger dans le nouveau tampon. Du point de vue de la configuration du client, ils ajoutent des échantillons dans un format basé sur des plaques au lieu de tubes et saisissent le volume final souhaité et le pourcentage d’échange.

Big Tuna calcule le temps d’exécution de chaque cycle et l’ajuste dynamiquement en fonction de l’exécution des échantillons.

Big Tuna utilise une pression positive pour filtrer, avec un mélange orbital. Ce processus garantit que la plaque entière est échangée uniformément et que l’échantillon ne se concentre pas au niveau de la membrane, ce qui peut entraîner un encrassement ou une agrégation de la membrane dans d’autres approches.

Après un certain temps, ce processus s’arrête et le volume de chaque échantillon est mesuré à l’aide d’un capteur acoustique sans contact. Big Tuna fait plusieurs autres choses avec ces chiffres.

Il détermine le volume à rajouter à chaque échantillon, détermine le pourcentage d’échange déjà effectué et estime le débit. Ce dernier nombre est utilisé pour estimer le nombre de cycles restants et le temps nécessaire pour effectuer le cycle suivant.

Il suit cela tout au long du processus jusqu’à ce que chaque échantillon ait atteint le pourcentage d’échange cible et le volume correct. Du point de vue de l’utilisateur, ils déposent leurs échantillons et, quelques heures plus tard, ils reviennent et leur expérience devrait être terminée.

Pourquoi la personnalisation du processus d’échange de tampons de Big Tuna est-elle bénéfique pour les utilisateurs ?

Vous disposez d’un niveau de contrôle dans ce processus que vous n’obtiendriez pas nécessairement en utilisant d’autres méthodes. Par exemple, dans un échantillon à haute concentration, je peux choisir de supprimer uniquement une petite quantité de tampon à chaque fois afin que mon échantillon ne s’agrège pas ou ne se concentre pas trop.

Je peux également prendre en compte les changements importants dans les propriétés du tampon en effectuant des suppressions de volumes plus petits à chaque cycle.

Pour des échantillons plus dilués, je peux l’exécuter rapidement pour terminer le processus plus rapidement. J’ai un certain degré de contrôle concernant le degré d’échange de tampon et le volume de tampon retiré dans chaque cycle individuel. Vous disposez également de données supplémentaires que vous n’auriez pas nécessairement via d’autres méthodes, telles que les propriétés de flux d’échantillons dans le nouveau tampon.

Si vous pouviez dire une chose aux utilisateurs potentiels de Big Tuna de les vendre sur l’appareil, quelle serait-elle ?

L’échange de tampon est une corvée, qui est généralement utilisée pour préparer votre échantillon pour autre chose. Récupérez votre temps et libérez-vous pour faire des choses plus importantes. L’avantage supplémentaire est que vous pouvez créer plus d’échantillons en même temps et suivre ce qui se passe à chaque étape du processus.

Pourquoi le nom « Big Tuna » a-t-il été choisi ?

Tous les produits Unchained Labs ont « UN » dans le nom et sont également censés être amusants. Big Tuna est un surnom pour Jim de Le bureau et Bill Parcells. Cela n’a rien à voir avec le processus d’échange de tampons, c’est juste amusant.

À propos des laboratoires déchaînés

Unchained Labs a pour objectif d’aider les chercheurs en biologie et en thérapie génique à se libérer des outils qui ne suffisent tout simplement pas. Lancer des produits de résolution de problèmes qui font une énorme différence dans la véritable science qu’ils réalisent chaque jour. C’est leur mantra, leur promesse et ils en sont propriétaires.


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