Dans une récente étude publiée sur bioRxiv* serveur de prétirage, les chercheurs ont caractérisé la proportion de neutrophiles (NP) des granulocytes de faible densité (LDG) chez les individus jusqu’à 14 mois après l’infection par le SRAS-CoV-2 (coronavirus du syndrome respiratoire aigu sévère 2).
Des études ont fait état d’un nombre élevé de LDG dans les infections graves au SRAS-CoV-2 ; cependant, l’impact à long terme de la maladie à coronavirus 2019 (COVID-19) sur l’expression du LDG et les altérations phénotypiques n’a pas été bien caractérisé. Des recherches supplémentaires sont nécessaires pour évaluer les contributions fonctionnelles des LDG au développement des séquelles pulmonaires post-aiguës du COVID-19 (PPASC).
Étude : Altération phénotypique des granulocytes de faible densité chez les personnes atteintes de séquelles pulmonaires post-aiguës d’une infection par le SRAS-CoV-2. Crédit d’image : Kateryna Kon/Shutterstock
À propos de l’étude
Dans la présente étude transversale, les chercheurs ont exploré les niveaux de LDG et leur association avec les symptômes du PPASC.
L’étude comprenait 12 personnes convalescentes infectées par le SRAS-CoV-2 présentant des symptômes pulmonaires et 10 personnes récupérées sans symptômes résiduels de COVID-19 (NRS). À titre de comparaison, 12 personnes séronégatives pour le virus de l’immunodéficience humaine (VIH) d’une étude menée précédemment ont été incluses en tant que témoins naïfs du SRAS-CoV-2 (NP).
Les participants à l’étude ont rempli des questionnaires concernant la démographie, les antécédents médicaux et les symptômes d’infection aiguë ou à long terme par le SRAS-CoV-2. Les patients PPASC ont été identifiés sur la base des tests de la fonction pulmonaire (PFT), en particulier des valeurs DLCO (capacité de diffusion du monoxyde de carbone) réduites après 30 jours de COVID-19 aigu.
Des échantillons de sang total ont été prélevés sur les participants et leurs cellules mononucléaires du sang périphérique (PMBC) ont été isolées. Par la suite, l’acide désoxyribonucléique exempt de cellules plasmatiques (cfDNA) et le CitH3 ont été quantifiés pour déterminer si la concentration extracellulaire du piège NP (NET) était élevée chez les convalescents infectés par le SRAS-CoV-2 en raison du nombre élevé de LDG avec une capacité accrue de libération de NET.
En outre, une analyse par cytométrie en flux (FC) et des dosages immuno-enzymatiques (ELISA) ont été effectués pour comparer les niveaux de LDG et leurs phénotypes en fonction de marqueurs d’activation, de maturation et de formation de NET. De plus, l’activation de LDG a été évaluée sur la base de l’expression de la myéloperoxydase (MPO) et du groupe de différenciation 11b (CD11b) et de la granularité de LDG.
De plus, l’équipe a cherché à savoir si la formation de NET était plus élevée chez les patients PPASC. Ils ont également étudié si l’agrégation plaquettaire-NP (PNA) est facilitée par les plaquettes activées dans les infections par le SRAS-CoV-2 en examinant l’expression de la P-sélectine (CD62P) sur les plaquettes liées aux LDG formant des NET.
Résultats
Les valeurs médianes de l’âge des participants dans les groupes NRS, PPASC et NP étaient de 55, 55 et 57 ans, respectivement, et la plupart (84 %) d’entre eux étaient des hommes. Le nombre de LDG était significativement plus élevé chez les patients PPASC que chez les patients NP. Les individus PPASC et NRS ont montré des nombres élevés de CD10 + et CD16SALUT Sous-ensembles de LDG par rapport aux témoins.
Les LDG des patients PPASC ont montré une capacité de formation de NET et une agrégation plaquettaire améliorées par rapport aux individus des groupes NRS et NP. Les LDG ont montré CD11b+/CD14–/CD15+/CD16+/CD45+ expression. Les patients PPASC ont montré une tendance à la hausse de la proportion de LDG (un pour cent) et un nombre de LDG significativement plus élevé que les témoins (1243 contre 372).
Il est intéressant de noter que les nombres de LDG étaient plus élevés, mais pas de manière significative, chez les individus NRS par rapport aux témoins, bien qu’avec une fréquence similaire à celle des témoins, ce qui indique une expansion préférentielle des LDG chez les individus NRS. CD10+ La fréquence des LDG était significativement plus élevée chez les individus PPASC et NRS que chez les témoins.
De même, CD10+ Les nombres de LDG étaient significativement plus élevés chez les individus des groupes PPASC (684) et NRS (337) que chez les témoins (105). Les LDG PPASC et NRS ont montré des scores d’intensité de fluorescence médiane (MFI) CD10 supérieurs à ceux des témoins. De plus, les scores MFI C16 et CD15 par granulocyte étaient significativement plus élevés chez les patients PPASC que chez les témoins, bien qu’une tendance à la hausse de l’expression élevée ait été observée dans le groupe NRS.
Les résultats ont indiqué que les LDG montraient une fréquence élevée de LDG matures et que leur nombre persistait à des niveaux élevés pendant plusieurs mois après le COVID-19, même parmi les patients récupérés du NRS COVID-19 dépourvus de symptômes résiduels du COVID-19. Les individus des groupes PPASC et NRS ont montré des NP LDG plus matures que les témoins, et le CD16salut et CD16lo Les sous-ensembles de LDG ont montré une expression plus élevée chez les patients PPASC.
CD16salut Les LDG des patients PPASC ont montré des phénotypes NP matures avec l’expression de CD10. Les individus convalescents COVID-19 ont montré une expression élevée de LDG de phénotype mature avec des scores MFI plus élevés pour MPO, indiquant une plus grande granularité des NP individuels convalescents COVID-19. Les LDG qui ont formé des NET ont montré une double positivité pour MP0 et CitH3 (histone H3 citrullinée). La fréquence des LDG formant des NET était plus faible chez les patients PPASC.
Cependant, les nombres de LDG correspondants étaient significativement plus élevés chez les PPASC et les NRS que chez les NP. L’activation de NP, les plaquettes liées au LDG, CitH3 et l’expression de cfDNA étaient plus élevées chez les patients PPASC que chez les témoins. Les scores MFI de la P-sélectine ne différaient pas significativement entre les groupes, indiquant que le PNA était indépendant de l’expression de la P-sélectine plaquettaire.
Dans l’ensemble, les résultats de l’étude ont montré qu’une augmentation persistante des marqueurs d’activation NP et de la formation de NET sur les LDG et une propension accrue à la formation de PNA chez les individus PPASC pourraient être associées au développement de séquelles pulmonaires à long terme de COVID-19.
*Avis important
bioRxiv publie des rapports scientifiques préliminaires qui ne sont pas évalués par des pairs et, par conséquent, ne doivent pas être considérés comme concluants, guider la pratique clinique/les comportements liés à la santé, ou traités comme des informations établies.